H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法
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H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法
H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法

H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-04-07 15:16:14
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产品简介

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详细介绍

公司提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。

产品名称:H辅酶ⅠNAD测试剂盒微量法

规格:100管/48样

检测方法:微量法

货号:FS-01S63210


商品介绍:

测定意义

辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。

测定原理

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153604.png

粗酶液提取:

1、细胞或组织样品的制备:

培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

Anti-2,4-D2,4-二氯苯氧乙酸 /除草剂/激素型除草剂抗体 0.1ml

Anti-5-HT5-羟色胺抗体 0.1ml

Anti-5-HTR1A5-羟色胺受体1A抗体 0.1ml

Anti-5-HT1B5-羟色胺受体1B抗体 0.1ml

Anti-5-HTR2A5-羟色胺受体2A抗体 0.1ml

Anti-5-LOX5-脂氧合酶抗体 0.1ml

anti-8-OHdG8-羟基脱氧鸟苷 0.2ml

Anti-AACT-α1α-1抗胰抗体 0.1ml

Anti-AATα-1抗抗体 0.2ml

Anti-AATF拮抗凋亡转录因子抗体 0.2ml

Anti-ABCB6ABCB6抗体 0.2ml

Anti-ABCG1三磷酸腺苷结合盒G1抗体 0.2ml

Anti-ABCG2三磷酸腺苷结合盒G2抗体 0.2ml

Anti-ABL1ABL1抗体 0.1ml

Anti-ABL2ABL2抗体 0.2ml

Anti-ACE1血管紧张素转换酶抗体 0.1ml

Anti-ACEI血管紧张素1转换酶抑制剂抗体 0.1ml

Anti-Acinus腺泡Acinus抗体 0.1ml

Anti-Ack1Ack1抗体 0.2ml

Anti-β-Actinβ-肌动蛋白抗体 0.1ml

Anti-ACTH促肾上腺皮质激素抗体 0.1ml

Anti-Actin α /α-SMA   肌动蛋白α抗体 0.1ml

Anti-AD7C-NTP/NTP/AF   神经丝蛋白抗体 0.1ml

Anti-ADAM-TS1/METH1  整合素样金属蛋白酶与型 0.2ml

Anti-ADAM-TS7   整合素样金属蛋白酶与l

Anti-Adducin protein内收蛋白抗体 0.2ml

Anti-ADFP/ADRP/adipophilin  脂肪组织分化相关蛋白抗体 0.2ml

Anti-Adipo R1  脂联素受体-1抗体 0.1ml

Anti-Adipo R2 脂联素受体-2抗体 0.1ml

接触蛋白1(CNTN1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Contactin 1 (CNTN1)96TMus musculus (Mouse)

多效生长因子(PTN)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Pleiotrophin (PTN)96THomo sapiens (Human)

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双调蛋白(AREG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)96TRattus norvegicus (Rat)

双调蛋白(AREG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)96TOryctolagus cuniculus (Rabbit)

双调蛋白(AREG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)96TBos taurus; Bovine (Cattle)

双调蛋白(AREG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)96TEquus caballus; Equine (Horse)

双调蛋白(AREG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)96TChicken (Gallus)

双调蛋白(AREG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Amphiregulin (AREG)96TSus scrofa; Porcine (Pig)

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骨成型蛋白2(BMP2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)96TRattus norvegicus (Rat)

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