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产品名称：NADKNAD激酶检测试剂盒微量法
规格：100管/48样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63212
商品介绍：
测定意义 NADK（EC 2.7.1.23）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。 测定原理： NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH；NADPH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT），通过在600 nm下测定MTT的还原速度（吸光值的变化）可反映出NADK活性的大小。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
组织因子途径抑制因子(TFPI)联免疫试剂盒梨形卷枝霉CaMKII-α (D10C11) Rabbit mAb
血栓调节蛋白(TM)联免疫试剂盒假丝酵母属TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)
补体因子4 (C4)联免疫试剂盒鼠李糖小短杆TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)
铁蛋白(FE)联免疫试剂盒酿酒酵母SimpleChIP® Human CDKN1B Promoter Primers
球蛋白G(IgG)联免疫试剂盒分枝杆SimpleChIP® Human EGR1 Intron 3 Primers
血清转铁蛋白(TF)联免疫试剂盒蒙古口蘑DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb
卵泡抑样蛋白1(FSTL1)联免疫试剂盒产气荚膜梭 C型DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb
赖酰氧化(LOX)联免疫试剂盒 链霉SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb
绒毛膜促性腺(CG)联免疫试剂盒冻土毛霉ADAP Antibody
生长(GH)联免疫试剂盒樟疫霉PhosphoPlus® Smad2 (Ser465/467) Antibody Duet
IV型胶原(COL4)联免疫试剂盒印度芽孢杆MAML1 (D3E9) Rabbit mAb
纤维连接蛋白(FN)联免疫试剂盒酿酒酵母Phospho-Stat3 (Tyr705) Blocking Peptide
白介9(IL-9)联免疫试剂盒斑玉蕈Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)
I型前胶原(PCI)联免疫试剂盒木蹄层孔Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (APC Conjugate)
III型前胶原(PCIII)联免疫试剂盒枯草芽孢杆枯草亚种XPD (D3Z6I) Rabbit mAb
NADKNAD激酶检测试剂盒微量法阴离子转运蛋白-1(人源）Anti-GAST Antibody大鼠白介12 p40（IL-12/p40）elisa定量检测试剂盒
阴离子转运蛋白-1（大、小鼠同源：人源见bs-0606P）Anti-GATA5 Antibody豚鼠糖蛋白130（gp130）elisa定量检测试剂盒
阴离子转运蛋白-3(抗原)Anti-GBA3 Antibody豚鼠三叶因子2（TFF2）elisa定量检测试剂盒
半乳糖凝集9（抗原）Anti-GAS41 Antibody豚鼠性磷（ALP）elisa定量检测试剂盒
胚胎干关键蛋白(多肽)Anti-GCFC2 Antibody豚鼠信号3B （SEMA3B）elisa定量检测试剂盒
骨桥蛋白（抗原）Anti-GCHFR Antibody豚鼠纤溶原激活物抑制因子1（PAI1）elisa定量检测试剂盒
抑癌基因p16（抗原）Anti-GBP4 Antibody大鼠骨成型蛋白4（BMP-4）elisa定量检测试剂盒
p21 核分裂抑制因子之一（抗原）Anti-GBP3 Antibody豚鼠甲状腺球蛋白（TG）elisa定量检测试剂盒
