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产品名称:MDHAR单脱氢抗坏血酸还原酶微量法
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63232
商品介绍:
测定意义 MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。 测定原理: MDHAR 催化 NADH 还原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+没有。通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算出MDHAR活性。 实验中所需仪器及设备: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和双蒸水 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
猪去精加压(dDAVP)试剂盒 Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit胚胎干相关蛋白FOPNL抗体
猪衰变加速因子(DAF)试剂盒 Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT磷化癌基因FOS蛋白B抗体
猪芳基硫酯A(ARSA)试剂盒 Human ANK1(Ankyrin-1) ELISA Kit叉头蛋白D2抗体
猪趋化因子CX3C受体1(CX3XR1)试剂盒Human ANLN (Actin-binding protein anillin) ELISA KIT叉头蛋白E3抗体
猪鸟苷激1(GUK1)试剂盒 Human ANKFY1 (Rabankyrin-5) ELISA KIT叉头蛋白F2抗体
猪脂肪分化相关蛋白(ADRP)试剂盒 Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit叉头蛋白H1抗体
猪热休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)试剂盒 Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT叉头蛋白I1抗体
猪磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)试剂盒Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT磷化叉头蛋白4抗体
猪甲状旁腺受体2(PTHR2)试剂盒Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT单跨膜蛋白FOXRED1抗体
猪颗粒体蛋白(GRN)试剂盒Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KITFOXRED2蛋白抗体
猪GATA结合蛋白5(GATA5)试剂盒Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT岩藻糖1磷鸟苷酰转移抗体
猪酪羟化(TH)试剂盒 Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT外基质蛋白FREM1抗体
猪血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒 Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT原癌基因FRAT1抗体
猪胚外胚层发育蛋白(EED)试剂盒Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT叉头蛋白D1抗体
猪着丝粒蛋白F(CENPF)试剂盒 Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT11重链抗体
MDHAR单脱氢抗坏血酸还原酶微量法乙型肝炎e抗原Anti-LPAR5 Antibody小鼠肝癌衍生生长因子(HDGF)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎e抗体Anti-LRG1 Antibody小鼠胰岛样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎核心抗体Anti-LPCAT2 Antibody小鼠巨噬移动抑制因子(MIF)elisa定量检测试剂盒
乙型肝炎核心抗体 IgMAnti-LRP10 Antibody小鼠神经丝蛋白(NF)elisa定量检测试剂盒
促黄体生成Anti-LRP10 Antibody小鼠基质金属蛋白原-9(Pro-MMP-9)elisa定量检测试剂盒
促卵泡生成Anti-LRP3 Antibody小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANκL)elisa定量检测试剂盒
催乳Anti-LRP11 Antibody小鼠白介12(IL-12)elisa定量检测试剂盒
孕酮Anti-LRRC41 Antibody小鼠白介13(IL-13)elisa定量检测试剂盒