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规格:50管/48样
检测方法:紫外分光光度法
货号:FS-01S63245
商品介绍:
测定意义 ICDHc(EC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPH。ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。 测定原理: 利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340 nm下测定NADPH浓度的增加。 所需的仪器和用品: 紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
猪叉头框蛋白O2(FOXO2)联免疫试剂盒枯草芽孢杆LCP1 Antibody
猪Nesfatin 1蛋白 (NES1)联免疫试剂盒 黏着玫瑰变色hnRNP Q/R Antibody
猪相关浆蛋白A(PAPPA)联免疫试剂盒球孢白僵FoxA1/HNF3α (E7E8W) Rabbit mAb
猪普通急性白血病抗原(CALLA)联免疫试剂盒 球孢白僵SimpleChIP® Human HMOX1 Promoter Primers
猪半乳糖苷β(GLβ)联免疫试剂盒雅致放射毛霉Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
猪趋化样因子超家族成员4(CKLFSF4)联免疫试剂盒大肠埃希NME1/NDKA (D14H1) Rabbit mAb
猪蛋白激C(PKC)联免疫试剂盒铜绿假单胞EGF Receptor (L858R Mutant Specific) (43B2) Rabbit mAb (Biotinylated)
猪神经营养性酪激2型受体(NTRK2)联免疫试剂盒Enterobacter cowanii Inoue et al. PathScan® Total MUC1 Sandwich ELISA Kit
猪肝配蛋白A4 (EFNA4)联免疫试剂盒克鲁弗酵母SimpleChIP® Mouse Ccdc57 Intron 5 Primers
猪成纤维生长因子9(FGF9)联免疫试剂盒热带假丝酵母Phospho-NMDA Receptor 2B (GluN2B) (Ser1284) Antibody
猪骨髓前体抑制因子1(MPIF-1/CCL23)联免疫试剂盒蜡状芽孢杆HDAC1 (10E2) Mouse mAb
猪脂多糖结合蛋白(LBP)联免疫试剂盒 短密青霉HDAC1 (10E2) Mouse mAb
猪肠脂肪结合蛋白(IFABP)联免疫试剂盒黄曲霉SHOC2 (D7N1A) Rabbit mAb
猪蛋白(NPHN)联免疫试剂盒香气红冬孢锁掷孢酵母Histone H2A.X (D17A3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
猪胎球蛋白A(FETUA)联免疫试剂盒 谷棒杆Ⅰ型SirT7 (D3K5A) Rabbit mAb
ICDHc胞浆异柠檬酸脱氢酶紫外分光光度法周期M2抗体Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒,DR-70TM ELISA kit
周期T2抗体Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人乙酰肝(HPA)ELISA试剂盒,HPA ELISA kit
周期K抗体Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人抗存活抗体/生存蛋白(Surv)ELISA试剂盒,Surv ELISA kit
抗肽CAMP抗体Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒,EMA IgA ELISA
5号染色体开放阅读框4抗体Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人衣原体蛋白样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒, CPAF ELISA
4号染色体开放阅读框44抗体Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人流感病抗体IgG(FLU)ELISA试剂盒,FLU ELISA
4号染色体开放阅读框33抗体Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人雌受体(ER)ELISA试剂盒,ER ELISA
4号染色体开放阅读框42抗体Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人3-羟基-3-甲基戊二酰A合1(HMGCS1)ELISA试剂盒,HMGCS1 ELISA