Sβ GC土壤β葡萄糖苷酶检测试剂盒微量法-上海抚生实业有限公司手机版

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产品属性：

产品名称	规格	检测方法	货号
Sβ GC土壤β葡萄糖苷酶检测试剂盒微量法	100管/48样	微量法	FS-01S63704

商品介绍：

测定意义

土壤β-葡萄糖苷酶能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理：

4-羟甲基-7-香豆(MUB)在 365 nm波长处激发, 能在 470 nm处检测到荧光, 它与某些物质结合后荧光特性消失, 通过酶的水解作用MUB释放出来, 通过检测荧光量来表征酶活性。

自备仪器和用品：

多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。

样本前处理步骤：
样本处理前须知

处理任何样本时,都必须注意:

(1) 实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头(2)实验前须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进行清洁,避免污染干扰实验结果。

(a)组织样品处理方法:

1、称取5±0.05g组织样品于50ml离心管中,先加入3ml已稀释好的样品提取液震荡2min;再加入10ml乙腈,充分震荡5min,

2、加入2g中性氧化铝;震荡2min ,室温4000r/min以上,离心10min;;

3、取6ml上清液于干净离心管中,加入5ml二氯甲烷震荡3min ,室温4000r/min以上,离心10min;;

4、取下层清澈液体于玻璃管中,加入20ul氧化剂混匀,在56℃条件下氮气或空气流吹至*干燥;

5、加入1ml复溶液,充分溶解干燥残留物。

6、取100ul 上清液与100ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,

7、取50ul进行分析。

样本稀释倍数: 1倍

(b)水样品处理方法:

1、取50ul 上清液与450ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,

2、取50ul进行分析。

样本稀释倍数:10倍

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实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

2、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。

3、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

4、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

5、实验时，要使底物避光保存。

6、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。

8、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。

10、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

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