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公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63223
商品介绍:
测定意义 NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。 测定原理: NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
猪延伸蛋白A(EloA)联免疫试剂盒 解脂假丝酵母解脂变种CHOP (L63F7) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
猪丝蛋白23(PRSS23)联免疫试剂盒枯草芽孢杆CCTα Antibody
猪八聚体结合转录因子1(OBTF1)联免疫试剂盒大豆慢生根瘤Nna1 Antibody
猪组织蛋白C(CTSC)联免疫试剂盒 解脂假丝酵母FBXL10 (D3T8J) Rabbit mAb
猪神经丝蛋白(NF)联免疫试剂盒桔青霉ARK5 Antibody
猪肌肉磷果糖激(PFKM)联免疫试剂盒 球孢白僵Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb
猪硫氧化还原蛋白(Trx)联免疫试剂盒QT6 CNOT1 (D5M1K) Rabbit mAb
猪重肽铁蛋白(FTH)联免疫试剂盒香菇Ran Antibody
猪葡萄糖6磷异构(GPI)联免疫试剂盒 砖红镰刀Hop Antibody
猪丝裂原激活蛋白激激6(MAP2K6/MKK6)联免疫试剂盒马赛Keratin 7 (D1E4) XP® Rabbit mAb
猪心肌营养样因子1(CLCF1)联免疫试剂盒 科罗拉多拟无枝Keratin 7 (D1E4) XP® Rabbit mAb
猪锚蛋白B(Ank-B)联免疫试剂盒 粟酒裂殖酵母XCR1 (D2F8T) Rabbit mAb
猪白分化抗原CD97(CD97)联免疫试剂盒 长根小奥德蘑鳞柄变种β3-Tubulin (TU-20) Mouse mAb
猪二氢嘧样2(DPYSL2)联免疫试剂盒 大肠埃希氏杆Bif-1 Antibody
猪钙周期蛋白结合蛋白(CACYBP)联免疫试剂盒酿酒酵母200 mM HEPES
NOXNADH氧化酶检测试剂盒可见分光光度法周期蛋白SG2N抗体Anti-GAA Antibody大球盖菇多少钱
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