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商品介绍:
测定意义 肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶将酰基转移至L-肉毒碱的反应,在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。 测定原理: 基于肉碱和脂酰辅酶在丙二酰辅酶存在与否的条件下,通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用,产生脂酰肉碱,并释放出巯基辅酶(COA-SH),与Ellman试剂DN-TB反应后,产生黄色的TNB。通过其吸收峰值得变化(412nm),来定量分析CPT-1的活性。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63551
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
鸡血清淀粉样蛋白A3(SAA3)试剂盒Anti-SRG2 AntibodyPE-Cy3标记的羊抗IgM
鸡肾小球组织糖基化终末产物(GTEAGE)试剂盒 Anti-SQSTM1 AntibodyPE-CY5标记的羊抗IgM
鸡丝蛋白2(PRSS2)试剂盒Anti-SRD5A1 AntibodyAPC标记的羊抗IgM
鸡原纤维蛋白2(FBN2)试剂盒Anti-SRG4 AntibodyAlexa Fluor 350标记的羊抗IgM
鸡球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIa(FcγR3A)试剂盒 Anti-SRCIN1 AntibodyAlexa Fluor 488标记的羊抗IgM
鸡尿游离皮质(UFC)试剂盒 Anti-SRI AntibodyAlexa Fluor 555标记的羊抗IgM
鸡非受体酪激2(TNK2)试剂盒 Anti-SRI AntibodyAlexa Fluor 647标记的羊抗IgM
鸡结蛋白(Des)试剂盒 Anti-SRP1/KPNA1 AntibodyPE-Cy5.5标记的羊抗IgM
鸡前蛋白转化枯草溶菌9(PCSK9)试剂盒 Anti-SRSF3 AntibodyPE-Cy7标记的羊抗IgM
鸡羧肽E(CPE)试剂盒Anti-SSR3 AntibodyCy3标记的羊抗IgM
鸡黑瘤黏附分子(MCAM)试剂盒Anti-SRY Antibody性磷(AP)标记的羊抗IgM
鸡骨保护配体(OPGL)试剂盒Anti-SSTR2 Antibody辣根过氧化物标记的羊抗IgM
鸡X型胶原(COL10)试剂盒Anti-SRSF1 Antibody(PB0431)辣根过氧化物标记的小鼠抗IgG
鸡胃蛋白原A(PGA)试剂盒Anti-SSTR3 Antibody性磷(AP)标记的小鼠抗IgG
鸡神经丝蛋白(NF)试剂盒Anti-SSX2 Antibody罗丹明标记的小鼠抗IgG
CPT1肉毒碱棕榈酰转移酶检测试剂盒微量法胰岛β生长因子Reg IIIα 抗体Anti-CXCL9 Antibody鲍曼不动杆图片
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