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产品名称：C4H肉桂酸4羟化酶检测试剂盒微量法
规格：100管/96样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63835
商品介绍：
测定意义 C4H又称反式肉桂酸-4-单氧化酶，多存在于高等植物、酵母、菌类中，该酶催化肉桂酸羟化作用产生4-香豆盐，是苯丙烷途径中继L-苯氨酸解氨酶之后的第二个关键酶。 测定原理： C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸盐和NADPH，在340nm下测定NADPH生成速率，即可反映C4H活性。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
EB病清道夫受体BEBV
磷化信号转导和转录激活因子3肽BPhospho-Stat3
HLAⅡ类组织相容性抗原，DPα1链抗菌肽HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain
主要组织相容性复合体Ⅱ类颗粒溶major histocompatibility complexⅡ
苹果脱氢2富组蛋白Malate Dehydrogenase2
前列腺E合2球蛋白样转录体受体Prostaglandin E Synthase 2
γ谷酰转肽丝狀血球凝集gamma glutamyl transpeptidase
白细胞介6绒毛蛋白/埃兹蛋白Interleukin 6
透明质嗜环蛋白/亲环AHyaluronic acid
Ⅳ型胶原肌养蛋白Collagen TypeⅣ
磷烯式丙酮羧激胶原凝集phosphoenolpyruvate carboxykinase
果糖-1,6-二磷伴侣蛋白10Fructose-1,6-Bisphosphatase
葡萄糖-6-磷纤调蛋白Glucose-6-phosphatase, catalytic
糖原合成钙网蛋白Glycogen synthase
趋化因子配体3网膜ELISA Kit for ChemokineLigand 3
C4H肉桂酸4羟化酶检测试剂盒微量法乙钠 98%穗花牡荆甙 分析标准品，≥98% Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体
硫代甜菜 12 98%桃叶珊瑚苷 分析标准品，≥98%Anti-Lysozyme 溶菌抗体
十二烷基硫钠 97%，电泳白果内酯 分析标准品，≥99%Anti-Lyn 膜相关蛋白酪激Lyn抗体
十二烷基硫钠 99.0%，超纯级巴卡丁 III 分析标准品，≥99%Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相关蛋白酪激Lyn抗体
硫代甜菜 8 98%松果菊苷 分析标准品，≥95% Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 磷化膜相关蛋白酪激Lyn抗体
硫代甜菜10 98%雪上一枝蒿甲 分析标准品，≥97%Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相关蛋白酪激Lyn抗体
二甲蓝FF 80%雪上一枝蒿乙 分析标准品，≥98%Anti-LYVE-1 管内皮透明质受体抗体
10.0μL微量进样器 尖头菊苣 分析标准品，≥98%Anti-M2-PK/PKM2 酮激-M2抗体
