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规格：100管/48样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63655
商品介绍：
测定意义 NAG是溶酶体中的一种酸性水解酶，广泛存在于各种组织、体液和细胞中，以前列腺和肾近曲小管细胞内含量最高。NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。 测定原理： NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。 自备用品： 酶标仪/可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
甘油-3-磷酰基转移大鼠皮质酮/肾上腺酮glycerol-3-phosphate O-acyltransferase
脂肪腮腺炎病IgMLipase
肉棕榈酰基转移大鼠内皮1carnitine palmitoyltransterase
脂肪转运蛋白腮腺炎病IgGfatty acid transport protein
脂肪脱饱和大鼠血管舒缓激肽fatty acid desaturase
葡萄糖激EB病IgMGlucokinase
胰岛大鼠抵抗Insulin
酰基A氧化EB病IgAAcyl-CoA Oxidase
甲酰磷合成1大鼠催乳carbamoyl phosphate synthase 1
甲酰磷合成1大鼠促生长释放carbamoyl phosphate synthase 1
丙羟化EB病IgGphenylalanine hydroxylase
甘油-3-磷酰基转移利什曼原虫抗体glycerol-3-phosphate O-acyltransferase
脂肪转运蛋白大鼠促肾上腺皮质fatty acid transport protein
脂肪脱饱和大鼠促卵泡fatty acid desaturase
葡萄糖激登革热抗体Glucokinase
NAGN乙酰βD葡萄糖苷酶检测试剂盒微量法荧光APC标记鸡IgGAnti-IL17B Antibody小鼠突触体相关蛋白25（SNAP-25） elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记鸡IgMAnti-IL17F Antibody小鼠凝血受体（TR）elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记狗IgGAnti-IL18R1 Antibody小鼠Agouti相关蛋白（AgRP）elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记狗IgMAnti-IL18 Antibody小鼠突触（SYP）elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记羊IgMAnti-IL18RAP Antibody小鼠硫氧化还原蛋白（Trx）elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记豚鼠IgGAnti-IL19 Antibody小鼠转膜含Emp24结构域蛋白1（TMED1）elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记豚鼠IgMAnti-IL1B Antibody小鼠血管内皮生长因子受体3（VEGFR3/Flt4）elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记马IgGAnti-IL1A Antibody小鼠内皮蛋白C受体（EPCR）elisa定量检测试剂盒
