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产品名称:CSL半胱氨酰亚砜裂解酶检测试剂盒微量法
规格:100管/48样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63414
商品介绍:
测定意义 半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属 (如卷心菜,菜花,西兰花),以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。 测定原理 CSL催化S-甲基-L-半胱氨亚砜反应产生丙酮酸,与2,4-二硝基肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
兔脑钠/脑钠肽(BNP)联免疫试剂盒大肠埃希氏Rb (4H1) Mouse mAb
兔Pdgfa相关蛋白(PDAP1)联免疫试剂盒慢生根瘤Rb (4H1) Mouse mAb
兔肾(REN)联免疫试剂盒苏云金芽孢杆库尔斯塔克亚种MARK3 Antibody
兔谷胱S转移pi基因(GSTpi)联免疫试剂盒 pGLuc-BasicTyk2 Antibody
兔粘附蛋白1(CYTH1)联免疫试剂盒 节杆属Stat Antibody Sampler Kit II
兔多药耐药相关蛋白1(MRP1)联免疫试剂盒白腐盾壳霉Rb (D20) Rabbit mAb
兔聚集蛋白聚糖(AGC)联免疫试剂盒 香茅假单胞Rb (D20) Rabbit mAb
兔细丝蛋白A(FLNα)联免疫试剂盒少根根霉Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb
兔肝脏/红酮激(PK)联免疫试剂盒拟隐孢壳GSK-3β (27C10) Rabbit mAb
兔白血病抑制因子(LIF)联免疫试剂盒E.coli BL21(DE3)codon plusGSK-3β (27C10) Rabbit mAb
兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)联免疫试剂盒豇豆慢生根瘤Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔丛生蛋白(CLU)联免疫试剂盒罗伦隐球酵母罗伦变种Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔粒趋化蛋白2(GCP-2)联免疫试剂盒山茶Phospho-GSK-3α (Ser21) (36E9) Rabbit mAb
兔中间α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)联免疫试剂盒溜曲霉Src Family Antibody Sampler Kit
兔C-肽(C-P)联免疫试剂盒果生链核盘ESET (D4M8R) XP® Rabbit mAb
CSL半胱氨酰亚砜裂解酶检测试剂盒微量法亚磷酯 98%连翘 分析标准品,>96.00% (HPLCInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰岛受体-β(抗原)
亚磷酯 CP,95.0% 藤黄 97% (HPLC)IRS-1 胰岛受体底物-1(抗原)
2-基-4-甲基嘧 98%连翘脂 分析标准品,>98%AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原
2,4-二氯嘧 98%原人参二 分析标准品,≥98%IRS-2 胰岛受体底物-2(抗原)
2,4-二氯-5-甲基嘧 98%番泻叶苷A 分析标准品,≥96%AQP1(Aquaporin1) 水通道蛋白-1抗原
2-羟基嘧盐盐 98%番泻苷B 分析标准品,≥97%(HPLC)IRS-3 胰岛受体底物-3(抗原)
2,4,6- 95%菝葜皂苷元 分析标准品,≥98%IRS-4 胰岛受体底物-4(抗原)
阿拉伯树胶 医药级知母皂苷A-Ⅲ 分析标准品,≥97%AQP5(aquaporin Protein-5) 水通道蛋白-5抗原