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产品名称：αKGDHα酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法
规格：50管/48样
检测方法：紫外分光光度法
货号：FS-01S63458
商品介绍：
测定意义 α-KGDH（EC 1.2.4.2）广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中，是三羧酸循环调控关键酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶。 测定原理 α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶生成琥珀酰辅酶、 二氧化碳和 NADH，NADH在340 nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。 需自备的仪器和用品 紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
生长因子受体结合蛋白10(Grb10)联免疫试剂盒匍枝根霉原变种PD-L1 (E1L3N®) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
生长因子受体结合蛋白14(Grb14)联免疫试剂盒白僵mTOR (7C10) Rabbit mAb (PE Conjugate)
生长因子受体结合蛋白2(Grb2)联免疫试剂盒香菇—五香1号DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
生长因子受体结合蛋白7(Grb7)联免疫试剂盒酿酒酵母DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
食欲B/阿立新B(OXB)联免疫试剂盒猴假单胞DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Pacific Blue™ Conjugate)
视黄诱导基因/RIG-1样受体(RLR)联免疫试剂盒 奇异球Atg2A Antibody
视网膜母瘤蛋白1(RB1)联免疫试剂盒 盘孢Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb
视网膜母瘤抑制蛋白(PRB)联免疫试剂盒 酿酒酵母Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb
嗜环蛋白/亲环A(CYPA)联免疫试剂盒 锗栓孔Rad54 (D4W3Z) Rabbit mAb
嗜环蛋白/亲环B(CYPB)联免疫试剂盒 芽胞杆Animal-Free Blocking Solution (5X)
嗜环蛋白/亲环D(CYPD)联免疫试剂盒 中国台湾根霉Animal-Free Blocking Solution (5X)
神经纤维网蛋白2(NRP2)联免疫试剂盒苹果落叶交链孢霉DAPT
柠檬合(CS)联免疫试剂盒假单胞属Actinomycin D
8-羟基鸟糖苷1(OGG1)联免疫试剂盒 硬结节杆Carfilzomib
嗜粒趋化因子受体(ECFR)联免疫试剂盒 根瘤His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
αKGDHα酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法自噬相关蛋白18抗体Human MARVELD3 ELISA Kit人补体7（C7）ELISA试剂盒,
自噬相关蛋白4A抗体Human MAS1L ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗体（OLAb）ELISA试剂盒,
载脂蛋白A4抗体Human MAST1 ELISA Kit兔子γ干扰（IFN-γ）ELISA试剂盒,
12脂氧合抗体Human MAST3 ELISA Kit间粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA试剂盒--动物，人
血管紧张III抗体Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit多肽YY（Peptide-YY）ELISA试剂盒--动物，人
腺苷环化3抗体Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit抗中性粒/中心体抗体（ACA）ELISA试剂盒--动物，人
血管动蛋白抗体Human Caspase 12 ELISA Kit艾柯病IgM（ECHO IgM）ELISA试剂盒--动物，人
腺病早期E1A蛋白抗体Human CD320 ELISA Kit糖蛋白130（gp130）ELISA试剂盒--动物，人
