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公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
规格:100管/48样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63412
商品介绍:
测定意义 是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中代谢因其初始底物不同,吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以氨酸为前体合成氨酸途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。 测定原理: 吡咯啉-5-羧酸合成酶催化氨酸生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。 需自备的仪器和用品: 可见外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
兔脑型肌激(CKB)试剂盒 Anti-B2M Antibody鱼白2抗体
兔唾液结合球蛋白样凝集12(SIGLEC12)试剂盒Anti-BAG2 Antibodypiwi样4蛋白抗体
兔核糖体蛋白S6激β1(RPS6Kβ1)试剂盒Anti-BAG2 Antibodypiwi样3蛋白抗体
兔颗粒溶(GNLY)试剂盒 Anti-BAG3 Antibody猪繁殖与呼吸综合征/猪蓝耳病病抗体
兔蛋白激C(PKC)试剂盒Anti-BAG1 Antibody凋亡相关蛋白10抗体
兔角蛋白13(CK-13/KRT13)试剂盒 Anti-BAG1 Antibody钙调蛋白依赖性蛋白激磷抗体
兔戊糖(PTD)试剂盒Anti-BAG5 Antibody丝/苏蛋白激PIM3抗体
兔周期依赖性激7(CDK7)试剂盒 Anti-BAG5 Antibody组蛋白精甲基转移5抗体
兔血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)试剂盒Anti-BAG3 Antibody原钙粘附蛋白11X抗体
兔甲状腺原(Thyronine)试剂盒Anti-BAK(BAK1) Antibody原钙粘附蛋白11Y抗体
兔因子受体样因子1(CRLF1)试剂盒Anti-BAG6 Antibody原钙粘附蛋白12/血管内皮钙粘蛋白2抗体
兔Ⅲ型胶原(COL3)试剂盒 Anti-BAP1 Antibody原钙粘附蛋白17抗体
兔淀粉样前体蛋白(APP)试剂盒 Anti-BAX Antibody原钙粘附蛋白1抗体
兔原纤维蛋白3(FBN3)试剂盒Anti-BAK1 Antibody原钙粘附蛋白α1抗体
兔抗利尿(ADH)试剂盒Anti-BAMBI Antibody原钙粘附蛋白α3抗体
P5CS吡咯啉5羧酸合成酶检测试剂盒微量法荧光Cy3标记小鼠IgG(流式同型对照)Anti-IL37 Antibody小鼠α1(Ta1)elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记羊IgG(流式同型对照)Anti-IL6 Antibody小鼠垂体腺苷环化激活肽38(PACAP-38)elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记大鼠IgG(流式同型对照)Anti-ILF3 Antibody小鼠心肌特异性肌钙蛋白 (c/TNNT2)elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记牛IgGAnti-IL9R Antibody小鼠弓形虫IgD抗体elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记牛IgMAnti-INA1 Antibody小鼠S100钙结合蛋白A10 (S100A10) elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记鸡IgGAnti-IL6 Antibody小鼠促甲状腺(TSH)elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记鸡IgMAnti-ILKAP Antibody小鼠5脂加氧(5-LO)elisa定量检测试剂盒
荧光Cy3标记狗IgGAnti-ING1 Antibody小鼠促血小板生成受体抗体elisa定量检测试剂盒