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产品名称：SP淀粉磷酸化酶检测试剂盒紫外分光光度法
规格：50管/48样
检测方法：紫外分光光度法
货号：FS-01S63576
商品介绍：
测定意义 淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase，SP）是淀粉代谢过程的可逆反应酶，既可催化淀粉的合成，也可催化淀粉的分解。 在高等植物中，淀粉磷酸化酶（合成方向）主要存在于质体中，负责延长淀粉的 α-1,4-葡萄糖链的非还原末端；淀粉磷酸化酶（分解方向）主要存在于细胞质基质中，催化淀粉中的α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸，负责葡萄糖链的磷酸解，是淀粉代谢过程中的关键酶。 在植物体中，淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级，一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解，因此，分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。 测定原理： 淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸，并在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原NADP+产生NADPH，使340nm下吸光值增加。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
鸡解旋样转录因子(HLTF)试剂盒Anti-TNFRSF9 AntibodyPE-Cy3标记的兔抗羊IgG
鸡血管紧张肽A(ATA)试剂盒 Anti-TNFSF11 AntibodyAlexa Fluor 350标记的兔抗羊IgG
鸡葡萄糖磷变位(PGM)试剂盒 Anti-TNFSF12 AntibodyAlexa Fluor 488标记的兔抗羊IgG
鸡延伸蛋白A(EloA)试剂盒 Anti-TNFSF13 AntibodyAlexa Fluor 555标记的兔抗羊IgG
鸡血小板相关抗体IgM(PA-IgM)试剂盒 Anti-TNFSF13B AntibodyAlexa Fluor 647标记的兔抗羊IgG
鸡前列腺内过氧化物合2(PTGS2/COX-2)试剂盒Anti-TNFSF13B AntibodyPE-Cy5.5标记的兔抗羊IgG
鸡趋化样因子超家族成员5(CKLFSF5)试剂盒Anti-TNFSF15 AntibodyPE-Cy7标记的兔抗羊IgG
鸡白分化抗原CD109(CD109)试剂盒 Anti-TNFSF13B AntibodyCy3标记的兔抗羊IgG
鸡软骨糖蛋白39(GP39)试剂盒 Anti-TNFSF13B AntibodyCy5标记的兔抗羊IgG
鸡血小板反应蛋白2(TSP-2)试剂盒 Anti-TNFSF14 AntibodyCy5.5标记的兔抗羊IgG
鸡天青1(AZU1)试剂盒 Anti-TNFSF18 AntibodyCy7标记的兔抗羊IgG
鸡白介3介导核因子(NFIL3)试剂盒Anti-TNFSF4 Antibody生物标记的兔抗羊IgG
鸡胃蛋白原C(PGC)试剂盒Anti-TNFSF8 Antibody罗丹明标记的兔抗羊IgG
鸡性别决定区Y框蛋白2(SOX2)试剂盒Anti-TNFSF8 Antibody性磷（AP）标记的兔抗羊IgG
鸡谷胱S-转移θ1(GSTθ1/GSTt1)试剂盒Anti-TNFα AntibodyFITC标记的兔抗羊IgG
SP淀粉磷酸化酶检测试剂盒紫外分光光度法叶 分析标准品，≥98%氧化铍 99.95% metals basisHuman plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 人血小板衍生生长因子
叶 用于和昆虫培养，≥97%S-苄基异硫脲盐盐 98.5%Human plaet activating factor,PAF ELISA Kit 人血小板活化因子
叶 用于植物培养,≥97%四氮唑蓝 98%Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人组织型纤溶原激活剂
2,4'-二溴乙酮 98%2,2'-联吡-4,4'-二甲 96%Human Tissue factor,IF ELISA Kit 人组织因子
2-基噻唑 97%鹰嘴豆芽A 分析标准品Human Beta-Thromboglobulin, Beta-TG ELISA Kit 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白
甲酰 CP硫化钡 99.7%,200目粉末Human Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4
3-甲基-2-环戊烯-1-酮 97%溴代丁二 96%Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 人功能相关抗原2
氧化铝 SP,99.999%3-溴戊烷 97%Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4
