SP淀粉磷酸化酶检测试剂盒微量法

SP淀粉磷酸化酶检测试剂盒微量法

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2022-04-11 16:36:56
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产品简介

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详细介绍

商品介绍:

测定意义

淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代谢过程的可逆反应酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。

在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于质体中,负责延长淀粉的 α-1,4-葡萄糖链的非还原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于细胞质基质中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸,负责葡萄糖链的磷酸解,是淀粉代谢过程中的关键酶。

在植物体中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级,一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。

测定原理:

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原NADP+产生NADPH,使340nm下吸光值增加。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

产品属性:

产品名称

规格

检测方法

货号

SP淀粉磷酸化酶检测试剂盒微量法

100管/96样

微量法

FS-01S63575

样本前处理步骤:

样本处理前须知

公司产品仅用于科研处理任何样本时,都必须注意:

(1) 实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头(2)实验前须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进 行清洁,避免污染干扰实验结果。

(a)组织样品处理方法:

1、 称取5±0.05g组织样品于50ml离心管中,先加入3ml已稀释好的样品提取液震荡2min;再加入10ml乙腈,充分震荡5min,

2、 加入2g中性氧化铝;震荡2min ,室温4000r/min以上,离心10min;;

3、 取6ml上清液于干净离心管中,加入5ml二氯甲烷震荡3min ,室温4000r/min以上,离心10min;;

4、 取下层清澈液体于玻璃管中,加入20ul氧化剂混匀,在56℃条件下氮气或空气流吹至*干燥;

5、 加入1ml复溶液,充分溶解干燥残留物。

6、 取100ul 上清液与100ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,

7、 取50ul进行分析。

样本稀释倍数: 1倍

(b)水样品处理方法:

1、取50ul 上清液与450ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,

2、取50ul进行分析。

样本稀释倍数:10倍

 

实验通用规则:

1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。

2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

5、实验时,要使底物避光保存。

6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。

10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

下列是公司正在出售的产品:

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SP淀粉磷酸化酶检测试剂盒微量法一异 AR,99.0%(S,S)-(+)-N,N′-双(3,5-二-叔丁基亚水杨基)-1,2-环已二 98%Anti-E2F3/FITC  荧光标记转录因子E2F-3抗体IgG

 AR,99.8%(R,R)-(−)-N,N′-双(3,5-二叔丁基亚水杨基)-1,2-环已二 Anti-E2F4/FITC  荧光标记转录因子E2F-4抗体IgG

三聚 99%二钌(II)二聚体  97%Anti-E2F5/FITC  荧光标记转录因子E2F-5抗体IgG

1,2- CP,98%双(环戊二烯)钌 99%Anti-E2F6/FITC  荧光标记抗转录因子E2F-6抗体IgG

三乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)双(五甲基环戊二烯)钌(II) 97%Anti-E2 tag/FITC  荧光标记E2 tag标签抗体IgG

三乙 AR,99.0%二氯二羰基双(三基膦)钌 98%Anti-E2 tag/HRP  辣根过氧化物标记E2 tag标签抗体IgG

三乙 CP,98.0%1,4 -双(二基膦)丁烷(1,5环辛二烯)铑(I)四氟 98%Anti-E7 protein/FITC  荧光标记人瘤病16型E7抗体IgG

三乙 for HPLC, ≥99.5% (GC)双(1,5-环辛二烯)-三氟甲磺铑 98%Anti-EAAT1/Glast /FITC  荧光标记胶质谷运载蛋白1 抗体IgG

 


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