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经销商厂商性质
上海市所在地
产品属性：
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
50管/48样 | 紫外分光光度法 | FS-01S63496 |
商品介绍：
测定意义 GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。 测定原理 3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD，340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH活性的高低。 需自备的仪器和用品 分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
样本前处理步骤：
样本处理前须知
处理任何样本时,都必须注意:
(1) 实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头(2)实验前须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进 行清洁,避免污染干扰实验结果。
(a)组织样品处理方法: 1、 称取5±0.05g组织样品于50ml离心管中,先加入3ml已稀释好的样品提取液震荡2min;再加入10ml乙腈,充分震荡5min, 2、 加入2g中性氧化铝;震荡2min ,室温4000r/min以上,离心10min;; 3、 取6ml上清液于干净离心管中,加入5ml二氯甲烷震荡3min ,室温4000r/min以上,离心10min;; 4、 取下层清澈液体于玻璃管中,加入20ul氧化剂混匀,在56℃条件下氮气或空气流吹至*干燥; 5、 加入1ml复溶液,充分溶解干燥残留物。 6、 取100ul 上清液与100ul 已稀释好的复溶液充分混合30s, 7、 取50ul进行分析。 样本稀释倍数: 1倍 | (b)水样品处理方法: 1、取50ul 上清液与450ul 已稀释好的复溶液充分混合30s, 2、取50ul进行分析。 样本稀释倍数:10倍
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实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
4、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时，要使底物避光保存。
6、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
8、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
