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产品名称：PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶微量法
规格：100管/96样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63493
商品介绍：
测定意义 PEPC（EC 4.1.1.31）广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是催化磷酸烯醇式丙酮酸与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶，对三羧酸循环的运转起重要调节作用。 测定原理： PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm测定NADH减少速率，计算PEPC活性。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
绵羊血小板衍生生长因子亚基A(PDGFA)联免疫试剂盒纤细屈曲海生Mouse ICAM-1 (intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit
绵羊X型胶原(COL10)联免疫试剂盒毛束霉Mouse ICAM-2 (intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit
绵羊α(LTA)联免疫试剂盒 屎肠球Mouse ICAM-3 (intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit
绵羊线粒体肌激1B(CKMT1B)联免疫试剂盒 金针菇Mouse IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit
绵羊髓分化因子88(MYD88)联免疫试剂盒干酪乳杆Mouse FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit
绵羊蛋白激Bγ(PKBG)联免疫试剂盒枯斑拟盘多毛孢Mouse IFI16/p16 (Interferon-inducible Protein 16) ELISA Kit
绵羊凋亡诱导因子(AIF)联免疫试剂盒 Lactococcus sp.Mouse IFN-α-Ab (Interferon-α Antibody) ELISA Kit
绵羊粘附蛋白1(CYTH1)联免疫试剂盒 匍匐曲霉Mouse UCP-1 (Uncoupling Protein 1, Mitochondrial) ELISA Kit
绵羊膀胱肿瘤抗原(BTA)联免疫试剂盒 草青霉Mouse FIL1d (Interleukin 1 Delta) ELISA Kit
绵羊补体成分3a(C3a)联免疫试剂盒 PseudarthrobacterMouse FIL1h (Interleukin 1 Eta) ELISA Kit
绵羊水通道蛋白3(AQP-3)联免疫试剂盒 粪纤维单胞Mouse IL-34 (Interleukin 34) ELISA Kit
绵羊破骨相关受体(OSCAR)联免疫试剂盒腐皮壳Mouse IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit
绵羊IV型胶原(COL4)联免疫试剂盒平菇新宇711Mouse IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit
绵羊组织型纤溶原激活因子(tPA)联免疫试剂盒少根根霉Mouse IL-7 (Interleukin 7) ELISA Kit
绵羊蛋白二硫化物异构A6(PDIA6)联免疫试剂盒米曲霉Mouse IL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit
PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶微量法溴代十四烷 98%聚氯乙烯 K-value 62-60 ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚层发育不良抗原
1-溴代正己烷 99%聚氯乙烯 K-value 59-55rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重组长因子
溴代正丁烷 CP,98% AR,99.5%（剧品）EGF(Epidermal growth factor)rat 重组表皮生长因子抗原(大鼠)
1-溴代正辛烷 98%三乙 CP,98.0%EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 类表皮生长因子域7抗原
1-溴-3-氯烷 99%四氯乙烯 AR，98%Egr-1(Early growth response 1) 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原
溴代异丁烷 98%间甲 GR,99%phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷化eIF-4E（Ser209）抗原
溴代叔丁烷, 包含0.5%碳稳定剂, CP乙乙烯酯 99.0%ELK1 转录因子ELK1抗原
溴代叔丁烷 >98.0%(GC)乙 98%Elastin 弹性蛋白抗原
