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产品名称:PA丙酮酸检测试剂盒可见分光光度法
规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63476
商品介绍:
测定意义 丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。 测定原理: 丙酮酸与2,4-二硝基肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基腙,在碱性溶液中呈樱红色。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
球蛋白A1 (IgA1)联免疫试剂盒不动杆Rat GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit
基质金属蛋白1(MMP-1)联免疫试剂盒玫瑰考克氏Rat GLUT4 (Glucose Transporter 4)ELISA Kit
球蛋白A2 (IgA2)联免疫试剂盒腐皮镰孢Rat GUSb (Glucuronidase, Beta) ELISA Kit
基质金属蛋白11(MMP-11)联免疫试剂盒果生链核盘Rat GCLM (Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit
基质金属蛋白2(MMP-2)联免疫试剂盒泡盛曲霉Rat GAD2 (Glutamate Decarboxylase 2, Acid) ELISA Kit
基质金属蛋白3(MMP-3)联免疫试剂盒 长裙竹荪Rat GDH (Glutamate Dehydrogenase) ELISA Kit
基质金属蛋白17(MMP-17)联免疫试剂盒阿卡班假丝酵母Rat GRIK2 (Glutamate Receptor, Ionotropic, Kainate 2) ELISA Kit
基质金属蛋白24(MMP-24)联免疫试剂盒匍枝根霉(黑根霉)Rat CCK-8 (Cholecystokinin 8) ELISA Kit
基质金属蛋白7(MMP-7)联免疫试剂盒灵芝(红芝, 赤芝)Rat GSTA1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit
基质金属蛋白8(MMP-8)联免疫试剂盒离生青霉Rat GSTO1 (Glutathione S Transferase Omega 1) ELISA Kit
基质金属蛋白9(MMP-9)联免疫试剂盒日本色盐杆Rat GSTT1 (Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit
基质金属蛋白抑制因子2(TIMP-2)联免疫试剂盒侵染链格孢Rat GSTT2 (Glutathione S Transferase Theta 2) ELISA Kit
基质金属蛋白抑制因子3(TIMP-3)联免疫试剂盒谷棒杆Rat HbA1C (Glycosylated Hemoglobin/Hemoglobin A1c) ELISA Kit
基质金属蛋白抑制因子4(TIMP-4)联免疫试剂盒季也蒙假丝酵母Rat PYGB (Glycogen Phosphorylase, Brain) ELISA Kit
甲状旁腺(PTH)联免疫试剂盒乳明串珠Rat PYGM (Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA Kit
PA丙酮酸检测试剂盒可见分光光度法线粒体钠/氢交换蛋白质2抗体Human CEBPD(CCAAT/enhancer Binding Protein(C/EBP), delta) ELISA Kit兔子内皮抑elisa检测试剂盒说明书
神经元1抗体Human BAX(Apoptosis regulator BAX) ELISA Kit兔子表皮生长因子elisa检测试剂盒哪里有买
神经肽Y抗体Human MAPK1(Mitogen-activated protein kinase 1) ELISA Kit鸭病性肠炎病elisa检测试剂盒多少钱
神经营养因子抗体Human CTLA4(Cytotoxic T-lymphocyte protein 4) ELISA Kit兔子内皮1elisa检测试剂盒品牌
谷受体2B抗体Human CEACAM1(Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1) ELISA Kit山羊白介10elisa检测试剂盒多少钱
神经纤毛蛋白2抗体Human C9(Complement component C9) ELISA Kit犬5羟色elisa检测试剂盒说明书
谷受体2D抗体Human BCL11B(B-cell lymphoma/leukemia 11B) ELISA Kit鸭白介8elisa检测试剂盒多少钱
原癌基因N-Ras抗体Human CCL28(C-C motif chemokine 28) ELISA Kit猴胰岛elisa检测试剂盒说明书