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产品名称:SSS可溶性淀粉合成酶检测试剂盒微量法
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63567
商品介绍:
测定意义 SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。 测定原理 SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。 需自备的的仪器和用品 紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
鸡脾脏酪激(SYK)联免疫试剂盒 酿酒酵母Human CFP (Complement Factor P) ELISA Kit
鸡胸腺嘧核苷磷化(TP)联免疫试剂盒巨大芽孢杆 AHuman C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit
鸡GATA结合蛋白3(GATA3)联免疫试剂盒嗜松青霉Human C3bR (Complement Fragment 3b Receptor) ELISA Kit
鸡糖基化磷脂酰肌特异性磷脂D1(GPLD1)联免疫试剂盒腐皮镰孢Human C3b (Complement Fragment 3b) ELISA Kit
鸡IX型胶原α3 (COL9α3)联免疫试剂盒韩国海杆状Human C3c (Complement Fragment 3c) ELISA Kit
鸡脂质运载蛋白2(LCN2)联免疫试剂盒山原申氏Human NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit
鸡β受体(LTβR)联免疫试剂盒 泡囊短波单胞Human C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit
鸡糖抗原125(CA125)联免疫试剂盒 黄色孢链霉Human C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit
鸡线粒体肌激1B(CKMT1B)联免疫试剂盒 孟氏假单胞Human C5b (Complement Fragment 5b) ELISA Kit
鸡血小板衍生生长因子C(PDGFC)联免疫试剂盒Cecembia sp.Human NPYR5 (Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit
鸡山梨脱氢(SDH)联免疫试剂盒大肠埃希氏Human ConA (Concanavalin A) ELISA Kit
鸡磷脂酰肌特异性磷脂Cγ2(PLCγ2)联免疫试剂盒球孢白僵Human CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit
鸡单核趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)联免疫试剂盒 环圈链霉Human CTAPIII (Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit
鸡外信号调节激(ERK)联免疫试剂盒 球孢白僵Human CX26 (Connexin 26) ELISA Kit
鸡活化Ⅻ(FⅫa)联免疫试剂盒 斑形叶点霉Human CX31 (Connexin 31) ELISA Kit
SSS可溶性淀粉合成酶检测试剂盒微量法硝 99.99% metals basis壬 97%VTG ELISA Kit 鲤鱼卵黄蛋白原
硝 99.997% metals basis壬 98%GnRH ELISA Kit 鱼类促性腺释放
高氯 CP,70.0-72.0%季戊四 AR,98.0%Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 鱼类状腺原
高氯 AR,70.0-72.0%乙二 99.4%Fish Cortisol ELISA Kit 鱼类皮质
高氯 70%, 99.999% metals basis三钠 97%Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 鱼类超敏C反应蛋白
高氯 GR,70.0-72.0%三 97%Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit 鱼骨钙/骨谷蛋白
高氯 ACS, ≥69% (T)阿斯巴甜 98%Cherax quadricarinatus lipovilin/vilin,Lv/Vn ELISA Kit 红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白
氯化 ≥99.99% metals basis碳镉 AR,98%Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit 罗氏沼虾诺达病