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商品介绍:
测定意义 GCS(EC 2.4.1.11)催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷键相连延长糖链,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰岛素作用的主要靶酶,对糖代谢的调节和血糖稳态的维持具有重要作用。 测定原理: GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映GCS活性。 需自备的仪器和用品: 分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
产品名称:GCS糖原合成酶检测试剂盒微量法
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63860
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
CAPZA2/CapZ alpha 2 F肌动蛋白α2亚基抗体 * 0.1ml
CTn1/Troponin I/TNNC1 心肌肌钙蛋白抗体 * 0.1ml
CT-1/CTF1 心肌营养1抗体 * 0.1ml
CA I/Carbonic anhydrase 1 1抗体 * 0.2ml
CTNNAL1 粘附分子相关蛋白a1抗体 * 0.1ml
CA II/Carbonic anhydrase 2 2抗体 * 0.1ml
CA IX 9抗体 * 0.1ml
/CSE1 细胞凋亡敏感性基因抗体 * 0.1ml
Phospho-Cas (Tyr165) 磷化细胞凋亡敏感性基因 * 0.1ml
Caspase-1(actived P10) 天冬-胱特异性蛋白家族抗体 * 0.1ml
Caspase 2 半胱胺蛋白-2抗体 * 0.1ml
Caspase-10 半胱胺蛋白-10抗体 * 0.1ml
Caspase-12 半胱胺蛋白蛋白-12抗体 * 0.1ml
Caspase-12 半胱胺蛋白蛋白-12抗体 * 0.1ml
Caspase-13/4 半胱胺蛋白蛋白-13抗体 * 0.2ml
GCS糖原合成酶检测试剂盒微量法新型核蛋白质1抗体Human PDGF-BB(Plaet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit大鼠组织因子elisa检测试剂盒品牌
核仁蛋白3抗体Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) ELISA Kit大鼠胎盘生长因子elisa检测试剂盒品牌
核孔蛋白1抗体Human PON1(Serum paraoxonase/arylesterase 1) ELISA Kit大鼠可溶性P选择elisa检测试剂盒哪里有买
NADPH氧化4抗体Human PRL(Prolactin) ELISA Kit大鼠内皮抑elisa检测试剂盒品牌
脂肪分化因子24Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) ELISA Kit大鼠白介9elisa检测试剂盒多少钱
肌动蛋白结合蛋白Z盘状蛋白抗体Human PTX3(Pentraxin 3) ELISA Kit大鼠白介13elisa检测试剂盒说明书
活化T核因子5蛋白抗体Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit大鼠肿瘤坏死因子αelisa检测试剂盒多少钱
磷化活化T核因子5蛋白抗体Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) ELISA Kit大鼠补体因子Helisa检测试剂盒多少钱