AH苯胺4羟化酶检测试剂盒微量法

AH苯胺4羟化酶检测试剂盒微量法

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2022-04-12 09:55:41
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产品简介

AH苯胺4羟化酶检测试剂盒微量法公司正在出售的产品:白免疫球蛋白样受体-B抗体BMPR-1A/FITC 荧光标记骨成型蛋白受体1A抗体IgG
CD33L抗体BNP/FITC 荧光标记脑钠抗体IgG

详细介绍

公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。

产品名称:AH苯胺4羟化酶检测试剂盒微量法

规格:100管/48样

检测方法:微量法

货号:FS-01S63667
商品介绍:

测定意义

细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶,在外源物质代谢中具有重要作用,尤其是药物和毒物的代谢。AH在P450酶系中相当于CYP2E1亚型,CYP2E1不仅参与了药物的代谢,而且还能催化多种前致癌物和前毒物的活化过程。

测定原理:

AH催化苯胺羟化后产生的4-氨基酚,进一步转变为酚-吲哚复合物,在630nm处有特征吸收峰;通过测定630nm吸光度增加速率,来计算AH活性。

自备仪器及用品:

普通离心机、超速离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、双蒸水和冰。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153604.png

粗酶液提取:

1、细胞或组织样品的制备:

培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

二氢尿嘧脱氢dehydrogenas

Klotho蛋白βKlotho β

羟赖吡啉hydroxylylpyridinoline

赖吡啉hydroxylylpyridinoline

8-羟基(脱氧)鸟8-oxoguanine glycosydase

丝蛋白serine protease

可溶性血管内皮生长因子受体2Soluble Vascuoar endothelial cell growth factor receptor2

谷酰胺glutamine

骨特异性性磷bone-specific alkaline phosphatase

降钙Calcitonin

甲状旁腺Parathyroid hormone

androgen

骨唾液糖蛋白Bone sialoprotein 2

肌肉肌激Creatine kinase M-type

骨钙Osteocalcin
AH苯胺4羟化酶检测试剂盒微量法硝铷 99.9% metals basis1-辛烷磺钠 98%Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit  人类似RIKEN cDNA 3110050K21 基因

氯化铷 SP氧化铍 99.95% metals basisHuman similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit  人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因

氯化铷 99.95% metals basis氧化铍 99%human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT  人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因

氯化铷 AR,99.5%铟 99.9999%RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) ELISA Kit  人ras同源物基因家族成员b

碳铷 99.8% metals basis氧化铟 99.99% metals basisHuman hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit  人假定蛋白LOC677340

氟化铷 AR硫铟 无水,99.99% metals basisHuman hypothetical protein LOC433328 ELISA Kit  人假定蛋白LOC433328

化铷 99.9%铍粉 99%,50目MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit  人髓样分化因子初次应答基因88

硫铷 SP氧化铍 99%Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit  人干扰活化基因205


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