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产品名称:HDLC血清高密度脂蛋白检测试剂盒微量法
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63547
商品介绍:
测定意义 高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,运载周围组织中的胆固,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子,俗称“血管清道夫”,对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。 测定原理 用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固,利用酯酶催化胆固酯水解生成游离胆固和游离脂肪酸,从而把胆固酯转化为FC;进一步利用胆固氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品 离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
鸡脂蛋白a(LP-a)试剂盒Anti-CNP Antibody流感病A抗原
鸡凋亡相关因子(FAS/CD95/TNFRSF6)试剂盒 Anti-CNP Antibody透明质/玻璃抗原
鸡抑瘤M(OSM)试剂盒Anti-CNOT7(CAF1) pAbHA tag标签多肽
鸡血浆抗凝蛋白S(PS)试剂盒 Anti-CNR2 AntibodyHA tag标签(分支多肽)
鸡苏酰tRNA合成(TARS)试剂盒 Anti-CNTN2 Antibody肝生长因子激活物抑制因子抗原
鸡转录激活因子-3(ATF-3)试剂盒 Anti-CNTN2 Antibody类血红蛋白α1抗原
鸡Bκ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(Nfkbie)试剂盒 Anti-CNTFR Antibody乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原
鸡补体因子8g(C8g)试剂盒 Anti-CNTN5 Antibody乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原
鸡血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)试剂盒Anti-CNTD2 Antibody肝炎病X蛋白(HBxAg)C端抗原
鸡血管生成样蛋白3(ANGPTL3)试剂盒 Anti-CNTN6 Antibodyα亚基绒毛膜促性腺多肽抗原
鸡球蛋白G Fc片段(Fcγ)试剂盒 Anti-COL11A1 Antibody膀胱肿瘤抗原
鸡胸腺依赖性抗原(TD-Ag)试剂盒Anti-COL13A1 Antibodyc-erbB-2受体抗体(N端)
鸡绒毛膜促性腺α肽(CGα)试剂盒Anti-CNTROB Antibodyc-erbB-2受体抗原(N端)
鸡角膜蛋白(KERA)试剂盒Anti-COL14A1 Antibody肝生长因子抗原
鸡凋亡诱导因子(AIF)试剂盒 Anti-COL16A1 Antibody类疱疹病8抗原
HDLC血清高密度脂蛋白检测试剂盒微量法乙-1-萘酯 99%2-巯基吡-1-氧化钠盐 40%水溶液P63 protein P63 肿瘤抑制基因(抗原)
草酰二肼 97%角鲨烷 99%OPG(Osteoprotegerin) 护骨(多肽抗原)
4-磺吡鎓 98%N-乙基-2-甲基吡咯烷 98%OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保护蛋白配体(抗原)
1,3-二甲基-2-咪唑啉酮 98%1-(2-二甲基基乙基)-1H-5-巯基-四氮唑 98%P311 protein 增生性瘢痕相关蛋白(抗原)
1,3-二甲基-2-咪唑啉酮 用于GC-HS, ≥99.8% (GC)1-乙基-2-吡咯烷酮 99%PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二磷多聚抗原
间甲 98%5-甲基四唑 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 内脂/内脏脂肪(人:N端多肽)、内脏脂肪、 又称:前B克隆增强因子、内肥、腹脂
扁桃苷 97%2-甲氧基-5-磺酰甲甲酯 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK 内脂/内脏脂肪(人、大、小鼠、猴同源:N端多肽)、内脏脂肪、前B克隆增强因子、内肥、腹脂
氧化苦参 98%叠氮钠 AR,99%(剧品)Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK 内脂/内脏脂肪(抗人、大、小鼠、猴:N端多肽)前B克隆增强因子、内肥、腹脂