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产品名称:CSP共价结合型果胶可见分光光度法
规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63885
商品介绍:
测定意义 果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分,主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是许多高等植物细胞壁中含量丰富的多糖成分,其*的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以Ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联,通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶,如水溶性果胶(WSP)、离子结合型果胶(ISP)和共价结合果胶(CSP)。 测定原理: 利用带有螯合剂的碱溶液提取共价结合型果胶(CSP),采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应,生成物质在530 nm处有最大吸收峰。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
ACD 肾上腺皮质发育异常蛋白抗体 * 0.2ml
ACHE/Acetylcholinesterase 乙酰胆抗体 * 0.1ml
Acinus Acinus抗体 * 0.2ml
phospho-Acinus(Ser1180) 磷化腺泡Acinus蛋白抗体 * 0.1ml
Ack1 醋激1抗体 * 0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr859/860) 磷化Ack1抗体 * 0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr284) 磷化Ack1抗体 * 0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr326) 磷化Ack1抗体 * 0.1ml
ACSL1 长链脂肪A连接1/2抗体 * 0.2ml
ACTH (1-39) 促肾上腺皮质(1-39)抗体 * 0.1ml
Phospho-MKP1 (Ser318) 磷化丝裂原活化蛋白激磷1抗体 * 0.1ml
ACTH (18-39) 促肾上腺皮质ACTH(18-39)抗体 * 0.1ml
ACTH (7-23) 促肾上腺皮质ACTH (7-23)抗体 * 0.1ml
Actin α/alpha-SMA 肌动蛋白α(α-SMA)抗体 * 0.1ml
Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α横纹肌辅肌动蛋白/α-SCA抗体 * 0.1ml
CSP共价结合型果胶可见分光光度法亚油钠 95%丰度:98atom%;化学纯度:≥98%VEGF(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA KIT 人血管内皮生长因子
海带多糖 ≥96%(HPLC)丰度:99atom%;化学纯度:≥98%VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA kit 人血管内皮粘附分子1
甲基烯月桂酯 96%尿-15N2 丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5%sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT 人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
二十甲酯 98% (GC)尿-15N2 丰度:99atom%;化学纯度:≥98.5%TRAIL-R4(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4
甲酯 75.0% (GC)丰度:99atom%;化学纯度:≥98.5% TRAIL-R3(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3
甲基环戊烷 98%丰度:10atom%;化学纯度:≥98.5% TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1
2-甲氧基-5-磺酰甲甲酯 98%丰度:10atom%;化学纯度:≥98%TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 人肿瘤坏死因子β
反-8-甲基-6-壬酰氯 97%丰度:99atom%;化学纯度:≥98% TNF- Alpha(Human Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 人肿瘤坏死因子α