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产品名称:胃蛋白酶检测试剂盒微量法
规格:100管/48样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63515
商品介绍:
测定意义 胃蛋白酶是一种消化性蛋白酶,由胃粘膜主细胞分泌,可将食物中蛋白质分解成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别,慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。 测定原理 胃蛋白酶可催化血红蛋白水解,其产物进一步与福林试剂反应后显蓝色;一定范围内,其颜色的深浅与胃蛋白酶活力呈正比。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
泪腺富脯蛋白4(PRR4)联免疫试剂盒Bacillus NTAL/LAB (D7I2B) Rabbit mAb
鞘脂激活蛋白原(PSAP)联免疫试剂盒嗜盐芽孢杆HES1 (D6P2U) Rabbit mAb
前列腺E合成(PTGES)联免疫试剂盒球孢白僵Phospho-p90RSK (Ser380) (D3H11) Rabbit mAb
干扰激基因15(ISG15)联免疫试剂盒柔嫩艾美耳球虫Tensin 2 Antibody
酰tRNA合成复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)联免疫试剂盒平菇Calumenin (4C6) Mouse mAb
11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)联免疫试剂盒 金针菇Phospho-MARCKS (Ser159/163) (D13D2) Rabbit mAb
12羟基二十烷四烯(12-HETE)联免疫试剂盒 酿酒酵母Phospho-KIF1B (Ser1487) Antibody
15脂加氧(15-LO)联免疫试剂盒 尖孢镰刀Phospho-DDR1 (Tyr792) Antibody
16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)联免疫试剂盒 曲霉SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb
β位淀粉样前体蛋白裂解1(BACE1)联免疫试剂盒*桦褐孔SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb
白介32(IL-32)联免疫试剂盒状鞘单胞PathScan® Total Smad2/3 Sandwich ELISA Kit
肿瘤坏死因子受体超家族成员1A(TNFRSF1A)联免疫试剂盒三孢布拉氏霉PathScan® Phospho-Smad2 (Ser465/467)/Smad3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit
26S蛋白体(26S-PSM)联免疫试剂盒 链霉PathScan® Total Smad3 Sandwich ELISA Kit
5羟基吲哚乙(5-HIAA)联免疫试剂盒 砖红镰刀PathScan® Phospho-Smad3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit
白介15(IL-15)联免疫试剂盒嗜热链球PhosphoPlus® IGF-I Receptor β Antibody Duet
胃蛋白酶检测试剂盒微量法乙酰化组蛋白H4抗体Human SPATA13 ELISA Kit纤维母生长因子4抗体流式组化
热休克蛋白B2抗体Human SPATA16 ELISA Kit粒-巨噬集落激因子抗体流式组化
人类白抗原B27Human SPAG4 ELISA Kit热休克蛋白-70抗体流式组化
螺旋环螺旋转录因子HATH6抗体Human SOX5 ELISA Kit丝裂原活化蛋白激p38抗体流式组化
神经调节蛋白1β2抗体Human SOX6( SRY-box 6) ELISA KitP-钙粘附分子抗体流式组化
HDHD3蛋白抗体Human SOX8 ELISA Kit丙酮脱氢激4抗体流式组化
HEATR3蛋白抗体Human SOX7 ELISA Kit高峰α-淀粉
癌增强蛋白抗体Human SP100 ELISA Kit去核试剂