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规格:100管/48样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63441
商品介绍:
测定意义 Ca++ Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。 测定原理: 根据Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
酮戊二脱氢大鼠基质金属蛋白5ketoglutarate dehydrogenase
白细胞介8抗胸腺球蛋白Interleukin 8
肿瘤坏死因子α抗表皮基底膜抗体Tumor necrosis factor α
Toll样受体2大鼠基质金属蛋白4Toll-like receptor 2
核因子κB小鼠过敏/补体片断4aNuclear factor-kappa B
骨诱导因子大鼠基质金属蛋白9/明胶BOsteoglycin
颗粒B抗中性粒/中心体抗体Gzms-B
穿孔;成孔蛋白小鼠状腺原Perforin
痘抗体大鼠基质金属蛋白抑制因子1Pox-Ab
内吗肽2抗白蛋白抗体Endomorphin2
木葡聚糖水解小鼠补体片断5axyloglucan endotransglycosylase
乙酰乳合成大鼠性成纤维生长因子Acetolactate Synthase
Afamin蛋白小鼠补体片断3aAfamin
对氧磷抗浦肯野抗体/抗Yo抗体paraoxonase
对氧磷1大鼠巨噬炎症蛋白5paraoxonase 1
Ca++Mg++ ——ATP酶检测试剂盒微量法正十六烷 >99.0% (GC)溴化银 99.9%Anti-Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) /FITC 荧光标记磷化丝裂原活化蛋白激MKK7抗体IgG
十八烷 AR,98%溴化银 98%Anti-MKP-1/DUSP1/FITC 荧光标记丝裂原活化蛋白激磷-1抗体IgG
5-氯 98%草锶 5N,99.999%Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 荧光标记磷化丝裂原活化蛋白激磷-1抗体IgG
3,5-二溴 98%氯化镝(III) 99.9%,无水级,充氩封装Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 荧光标记磷化丝裂原活化蛋白激磷-1抗体IgG
3,5-二氯 98%二氧化硅 ARAnti-MKP-2/DUSP4/FITC 荧光标记丝裂原活化蛋白激磷-2抗体IgG
CP(剧品)氧化银 99.99% metals basisAnti-MLK3 /FITC 荧光标记丝/苏蛋白激MLK3抗体IgG
磷 AR,99.00%(剧品)二氧化硅 99.99%,1-3mmAnti-Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC 荧光标记磷化丝/苏蛋白激MLK3抗体IgG
叔丁钠 98%化银 99.99%Anti-MLCK/FITC 荧光标记肌球蛋白轻链激抗体IgG