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产品名称:TS海藻糖合成酶检测试剂盒可见分光光度法
规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63600
商品介绍:
测定意义 海藻糖是功能性低聚糖,具有非还原性、保湿性、热酸稳定性、抗冻结性等特性,是细胞在不良环境条件下产生的一种重要的抗逆应激物之一,它对生物大分子和生物体组织有着非特异性的保护作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麦芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的关键途径之一。 测定原理: TS催化麦芽糖产生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麦芽糖为葡萄糖,通过葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,按照麦芽糖减少的量表示海藻糖合酶活性。 需自备的仪器和用品: 分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
肌纤蛋白(MYOC)检测试剂盒金龟子绿僵Chicken S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit
肉棕榈酰基转移1A(CPT1A)检测试剂盒酿酒酵母Chicken EMILIN 1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit
叉头框蛋白A2(FOXA2)检测试剂盒微小链霉Chicken PRSS12 (Protease, Serine 12) ELISA Kit
回肠脂肪结合蛋白(FABP6)检测试剂盒*百脉根根瘤Chicken αMSH (Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit
白关联球蛋白样受体2(LAIR2)检测试剂盒污斑新拟盘多毛孢Chicken Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit
核仁(NCL)检测试剂盒彩色豆马勃Chicken NUP98 (Nucleoporin 98kDa) ELISA Kit
染色框同源物3(CBX3)检测试剂盒茶薪菇Chicken CNTNAP2 (Contactin Associated Protein Like Protein 2) ELISA Kit
Cathelicidin抗肽(CAMP)检测试剂盒球孢白僵Chicken ACP1 (Acid Phosphatase 1) ELISA Kit
核仁磷蛋白(NPM)检测试剂盒大肠埃希氏Chicken F13B (Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit
2',5'-寡腺苷合成1(OAS1)检测试剂盒谷棒杆Ⅰ型Chicken ASM (Acid Sphingomyelinase) ELISA Kit
神经纤维网蛋白1(NRP1)检测试剂盒产肠大肠埃希氏Chicken IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit
戊糖(PTD)检测试剂盒Chicken PPIL1 (Peptidylprolyl Isomerase/Cyclophilin Like 1) ELISA Kit
血管抑(ANG)检测试剂盒酿酒酵母Chicken PLTP (Phospholipid Transfer Protein) ELISA Kit
密封蛋白(OCLN)检测试剂盒小麦生链格孢Chicken KLK7 (Kallikrein 7) ELISA Kit
封闭蛋白1(CLDN1)检测试剂盒大囊毛霉Chicken CA6 (Carbonic Anhydrase VI) ELISA Kit
TS海藻糖合成酶检测试剂盒可见分光光度法小鼠β葡萄糖苷Anti-RAPGEF1 Antibody半胱蛋白9检测试剂盒
大鼠高迁移率族蛋白B1Anti-RASGRF1 Antibody半胱蛋白抑制剂;胱抑C检测试剂盒
大鼠相关血浆蛋白AAnti-RASGRF1 Antibody半乳甘露聚糖检测试剂盒
人胆囊收缩/肠促肽Anti-RASL10A Antibody半乳糖凝集1检测试剂盒
小鼠谷脱羧自身抗体Anti-RAPGEF5 Antibody半乳糖凝集2检测试剂盒
大鼠内皮脂肪Anti-RASD2 Antibody半乳糖凝集3检测试剂盒
人Ⅲ型前胶原肽Anti-RASSF4 Antibody半乳糖凝集9检测试剂盒
小鼠雌二受体Anti-RAX Antibody 胞浆型磷脂A2检测试剂盒