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产品名称:CarE羧酸酯酶检测试剂盒微量法
规格:100管/96样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63432
商品介绍:
测定意义 哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。 测定原理: CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450 nm光吸收增加速率,计算CarE活性。 自备仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
兔表皮转谷酰(TGM3)试剂盒Anti-ACTN3 Antibody阴离子转运蛋白-1抗体
兔基质金属蛋白-10(MMP-10)试剂盒Anti-ACVR2A Antibody阴离子转运蛋白-3抗体
兔纤维母表面抗原(FSP)试剂盒 Anti-ACTN3 Antibody(PB1079)催产受体(缩宫受体)抗体
兔白介12(IL-12)试剂盒Anti-ACTN4 Antibody紧密连接蛋白抗体
兔磷脂酰肌特异性磷脂Cγ2(PLCγ2)试剂盒Anti-ACVR2B Antibody卵巢癌反应抗原抗体
兔分泌粒蛋白II (SCG2)试剂盒Anti-ADA Antibody大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体
兔凝溶胶蛋白(GS)试剂盒 Anti-ADA Antibody神经丛蛋白B1抗体
兔胶原II(Collagenase II)试剂盒 Anti-ADA Antibody(PB0960)磷化蛋白激C(T410)抗体
兔脑环指蛋白(BFP)试剂盒Anti-ADAM10 Antibody磷化蛋白激C mu型抗体
兔丝蛋白8(PRSS8)试剂盒Anti-ADAM15 Antibody磷化蛋白激C mu型抗体
兔腺苷环化相关蛋白1(CAP1)试剂盒 Anti-ADAM17 Antibody表面受体PILRβ抗体
兔多巴β羟化(DβH)试剂盒 Anti-ADAM17 Antibody前列腺癌相关蛋白4抗体
兔Slit同源物2(Slit2)试剂盒Anti-ADAM10 Antibody线粒体导肽水解β抗体
兔二磷尿核苷葡糖基转移2家族肽B4(UGT2B4)试剂盒Anti-ADAM19 Antibody富含脯蛋白15抗体
兔抗糖蛋白抗体(GP)试剂盒 Anti-ADAM15 AntibodyK依赖的蛋白C轻链抗体
CarE羧酸酯酶检测试剂盒微量法胰高血糖样肽-2抗体Human USP49 ELISA Kit大鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)Elisa测定试剂盒
甘受体alpha 1/2/3型抗体Human USP5 ELISA Kit豚鼠白三烯B4(LTB4)Elisa测定试剂盒
抑制型G蛋白α3抗体Human USP50 ELISA Kit鸡抗凝血Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)Elisa测定试剂盒
促性腺释放受体抗体Human USP53 ELISA Kit鸡5核苷(5-NT)Elisa测定试剂盒
生长因子受体结合蛋白2抗体Human USP9X ELISA Kit兔尿激型纤溶原激活物(uPA)Elisa测定试剂盒
GATA结合蛋白3抗体Human USP35 ELISA Kit抗植物蛋白大豆、花生AhDMT-1抗体流式组化 Anti-AhDMT 1
粒-巨噬集落激因子受体α抗体Human USP36 ELISA Kit激活受体2A/激活受体相互作用蛋白2a抗体流式组化
骨形态形成蛋白拮抗蛋白抗体Human USP37 ELISA Kit溴脱氧尿苷抗体流式组化