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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97298 |
商品属性:
名称 大鼠骨骼肌细胞 2.组织来源:骨骼肌组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞,细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方,细胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠骨骼肌细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠骨骼肌细胞经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R084 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)免疫试剂盒现货供应
人脂联素(ADP)免疫试剂盒进口、分装
人铁调素(Hepc)免疫试剂盒进口、分装
人间α-胰蛋白抑制因子重链H1(ITIH1)免疫试剂盒*直销
人大内皮素(Big ET-1)免疫试剂盒*直销
人EB病毒衣壳抗原(EBVCA)抗体(IgG)免疫试剂盒*直销
牛纤连蛋白(FN)免疫试剂盒进口、分装
大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)免疫试剂盒进口、分装
大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)免疫试剂盒进口、分装
大鼠Ⅲ型前胶原C端肽
大鼠骨骼肌细胞Seman platycladi柏子仁探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Mouse Anti-Bov IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1mlANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4 管生成素3/管生成素4抗体 规格: 0.1ml
Eurytrema pancreaticum胰阔圆盘吸虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周FMDV Polyprotein (VPg2 protein) 口蹄疫毒A型抗体 规格: 0.2mlphospho-MEF2C(Ser396) 磷酸化肌细胞增强因子2C抗体 规格: 0.1ml
Jamestown Canyon Virus (JCV)詹姆士城峡谷病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PRKAG2/AMPKγ2 苷单磷酸活化蛋白激γ2抗体 规格: 0.2mlEphB1+EphB2 酪蛋白激受体B1+B2抗体 规格: 0.2ml
Rhizoma phragmitis芦根LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SIRT1/sirtuin 1 沉默调节蛋白1抗体 0.1mlphospho-GATA-4(ser 262) 磷酸化GATA结合蛋白4抗体 规格: 0.1ml
Human Polyomavirus 6 (HPyV6)人多瘤病毒6 LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-MAP2(Ser136) 磷酸化微管相关蛋白2抗体 规格: 0.1mlSLC25A20 线粒体二羧酸载体蛋白20抗体 0.1ml
Mycoplasma hominis人支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周C22orf31 22号染色体开放阅读框31抗体 规格: 0.2mlASTE1 ASTE1蛋白抗体 规格: 0.2ml
Clavibacter michiganensis ssp. michiganensis番茄溃疡病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Gax 生终止特异性同源盒基因抗体 规格: 0.2mlC17orf82 17号染色体开放阅读框82抗体 规格: 0.2ml
Classical Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(C-PRRSV)猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型经典株探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 负20度 一年 2-4周HSPA6 热休克蛋白70家族蛋白6抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
Cupixi virus(CPXV)库皮科斯病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗水貂IgG 规格: 0.1mlTransketolase(CT) 转酮醇(转羟乙醛)抗体(C端) 规格: 1ml
Penicillium spp.青霉通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Ube2L3 泛素蛋白连接L3抗体 规格: 0.2mlCLLD7 核苷酸交换因子CLLD7抗体 规格: 0.2ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。