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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97420 |
商品属性:
名称 大鼠肝枯否细胞 2.组织来源:肝脏组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠枯否细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。枯否氏细胞(Kupffer细胞)是肝脏的肝血窦内一些固定于窦壁的巨噬细胞,它能吞噬和清除大部分从肠道来的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血窦中的细菌、异物和衰老的红细胞,并把血红蛋白分解成。此外,肝巨噬细胞也有处理抗原,诱导T细胞增殖,参与免疫调节的作用。枯否氏细胞和一般巨噬细胞不同,枯否氏细胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或减弱抗原性的作用。枯否氏细胞能吞噬来自血液循环的抗原抗体复合物和其他有害物质,以消除这些物质对机体的损害。枯否细胞功能障碍可导致肠源性内毒素血症。电镜下有很多皱褶和微绒毛。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠肝枯否细胞采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心、差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠肝枯否细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R132 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、巨噬细胞 传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液(12mM) 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人多聚腺苷二核糖聚合(PARP)免疫试剂盒现货供应
小鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫试剂盒进口、组装
小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)免疫试剂盒现货供应
山羊脂蛋白脂(LPL)免疫试剂盒*直销
人胃蛋白原C(PG-C)免疫试剂盒现货供应
人粒细胞集落刺激因子(CSF3)抗体免疫试剂盒进口、组装
人谷脱羧65(GAD65)免疫试剂盒现货供应
人α乳清蛋白(α-La)免疫试剂盒现货供应
犬Bcl-2相关X蛋白(BAX)免疫试剂盒进口、分装
鸡γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒进口、组装
大鼠肝枯否细胞Rhizoma paridis重楼探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周INCA1 INCA1蛋白抗体 规格: 0.2mlADAMTS4 整合素样金属蛋白与凝4型抗体 0.1ml
Turkey Astrovirus(TAstV)火鸡星状病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CCDC125 卷曲螺旋结构域蛋白125抗体 规格: 0.2mlWnt8b WNT蛋白家族Wnt8b抗体 规格: 0.2ml
Staphylococcus aureus探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Acetyl-Histone H4(K16) 乙酰化组蛋白H4(K16)抗体 0.1mlPhospho-ATP1A1(Ser23) 磷酸化钠钾ATP蛋白a1抗体 规格: 0.1ml
Cortex lycii地骨皮探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周CNOT8 细胞表面趋化因子受体4相关蛋白8抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM 兔抗马IgM 规格: 1mg
Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )传染性脾肾坏死病病毒LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PAK7/PAK5/MBT 激活激PAK7抗体 规格: 0.2mlPhospho-PLC gamma 2(Tyr753) 磷酸化磷酯Cγ2抗体 规格: 0.1ml
Babesia equi马巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周TIMM17A 线粒体内膜转位抗体 规格: 0.2mlCLDND2 膜蛋白CLDND2抗体 规格: 0.2ml
Bovine Immunodeficiency Virus(BIV)牛免疫缺损病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周H1N1 Hemagglutinin 1/HA probe 甲型毒凝素抗体 规格: 0.2ml
Semen phaseoli赤小豆探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Claudin 11/OSP(Oligodendrocyte Marker) 少突胶质细胞跨膜蛋白抗体 规格: 0.1ml
Streptomyces spp.链霉通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Lin28 RNA结合蛋白LIN28抗体 规格: 0.2ml
Giardia lamblia蓝氏贾第鞭毛虫A型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CK3 细胞角蛋白3抗体 规格: 0.1ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。