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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
商品介绍
测定意义 LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。 测定原理: LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
Rhizobium galegaeJOE因子检测试剂盒
Rhizobium galegaeCD47蛋白检测试剂盒
Rhizobium galegae带3蛋白检测试剂盒
Rhizobium galegae抗角蛋白抗体检测试剂盒
Rhizobium galegae促泌素检测试剂盒
Rhizobium galegae硫代嘌呤S-甲基转移检测试剂盒
Rhizobium galegae早期分泌抗原靶6检测试剂盒
Rhizobium galegae血管性血友病因子裂解检测试剂盒
核酸提取及纯化试剂盒草 Standard for GC,≥99.6% 大鼠金属转运蛋白1(MTP1)免疫试剂盒DNA复制抑制因子抗体HPR 结合珠蛋白相关蛋白抗体
草 ≥99.998% (metals basis)大鼠金属硫蛋白2(MT-2)免疫试剂盒G蛋白α抑制蛋白2抗体HPL/PL 人胎盘泌素抗体
草 ≥99.9999% (metals basis)大鼠金属硫蛋白(MT)免疫试剂盒G蛋白偶联受体γ4抗体HPGD/PGDH1/Prostaglandin dehydrogenase 1 前列腺素脱氢1抗体
4-溴磺酰 98%大鼠解整合素样金属蛋白9(ADAM9)免疫试剂盒G氨丁B型受体2抗体HPCL2 植烷酰辅A羟化2抗体
3-环己 99%大鼠解整合素样金属蛋白8(ADAM8)免疫试剂盒葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)HP1 gamma 异染色质蛋白1-γ抗体
上光油铁罐(直径127mm*250mm)大鼠解整合素样金属蛋白19(ADAM19)免疫试剂盒葡萄糖调节蛋白94抗体HP1 alpha 异染色质蛋白1-α(HP1α)抗体
上光油铁罐 直径73mm*高度150mm大鼠睫状神经营养因子(CNTF)免疫试剂盒糖原合激-3β抗体HOXD10 同源盒蛋白HOXD10抗体
天然黄蜂蜡 医药级(CP2005版)大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒糖原合激-3β抗体HOXC9 同源盒蛋白HOXC9抗体
蜂蜡 46-60°C大鼠结缔组织生长因子(CTGF)免疫试剂盒三鸟苷环水解抗体HOXc8 HOXc8抗体
蜂蜡 62-67°C大鼠结蛋白(Des)免疫试剂盒促代谢型谷氨受体5抗体HOXB8 同源盒蛋白B8抗体
天然白蜂蜡 医药级(CP2005版)大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)免疫试剂盒生长调节致癌因-1抗体GROaHOXB5 同源盒蛋白HOXB5抗体
3,5-二溴 98%大鼠角化生长因子(KGF)免疫试剂盒G蛋白偶合受体激1抗体HOXB4 HOXB4抗体
5--4,6-二羟嘧 97%大鼠角化内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)免疫试剂盒促胃泌素释放肽抗体HOXB2 同源盒蛋白B2抗体
4,6-二-5-嘧 98%大鼠胶质系来源的神经营养因子(GDNF)免疫试剂盒化G蛋白通路抑制蛋白1抗体HOXA9 同源盒蛋白HOXA9抗体
二聚环戊二烯 97%,Endo大鼠胶原吡交联(PYD)免疫试剂盒脑糖原化抗体HOXA5 同源异型盒因HOXA5蛋白抗体
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。