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高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次图片产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次图片变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不*, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, 高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合.
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次图片DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间*结 合,长时间退火没有必要。
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次图片使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
Prostaglandin F2α methyl ester (1 mg) 9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGF2α methyl ester; Prostaglandin F2α methyl ester
Dibutyryl-cGMP (sodium salt) (10 mg) Dibutyryl Guanosine 3’,5’-cyclic monophosphate; N-(1-oxobutyl)-cyclic 3’,5’-(hydrogen phosphate) 2’-butanoate guanosine, monosodium salt
三水FeNaEDTA(1KG) FeNaEDTA, 3H2O, 15708-41-5; MW 421.3
Suc-AAPF-pNA (100 mg) N-(3-carboxy-1-oxopropyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-nitnophenyl)-L-phenylalaninamide; Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitnoanilide; Suc-AAPF-pNA
7(Z),11(Z)-Nonacosadiene (1 mg) (7Z,11Z)-nonacosadiene; 7(Z),11(Z)-Nonacosadiene
N-[4-[(2R,4R,6S)-4-[[(4,5-Diphenyl-2-oxazolyl)thio]methyl]-6-[4-(hydroxymethyl)phenyl]-1,3-dioxan-2-yl]phenyl]-N’-hydroxyoctanediamide Tubacin
FFA Assay Buffer (40 ml) FFA Assay Buffer
*基化组蛋白H3K27多肽 Trimethyl Histone H3K27 Peptide (200 ul)
Tamoxifen (1 g) 2-[4-[(1Z)-1,2-diphenyl-1-buten-1-yl]phenoxy]-N,N-dimethyl-ethanamine; Tamoxifen
4-Fluorobuphedrone (hydrochloride) (5 mg) 4-FBP; 1-(4-fluorophenyl)-2-(methylamino)butan-1-one, monohydrochloride
LE 135 (5 mg) 4-(7,8,9,10-tetrahydro-5,7,7,10,10-pentamethyl-5H-benzo[e]naphtho[2,3-b][1,4]diazepin-13-yl)-benzoic acid; LE 135
PtdIns--3,4)-P2 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt) (5 mg) DHPI-3,4-P2|Phosphatidylinositol-3,4-bisphosphate C-6, PtdIns--3,4)-P2 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt
Prostaglandin E2 Express EIA Standard (1 ea) PGE2 EIA Express Standard; Prostaglandin E2 Express EIA Standard
6-Azidohexanoic Acid (100 mg) Click Tag
4-Fluororesorcinol 超级纯 4-Fluororesorcinol Ultrapure Grade
(R)-Butaprost (50 mg) 9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; (R)-Butaprost
Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide (50 mg) N-(2-chloroetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2’-chloro-AEA; Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide
(S)-8-chloro-2-(pyrrolidin-2-yl)benzofuro[3,2-d]pyrimidin-4(3H)-one BMS-863233 xy7nochloride
PALCAMAgar
亚盐琼脂 Sulfite Agar 用于厌氧亚盐还原杆菌的试管计数(SN标准)
真菌琼脂培养基 Fungi Agar 250克 生物制品真菌无菌检验
MiddleBrook7H基础250g/瓶用于分枝杆菌的分离培养,每90ml培养基中添加0.5ml甘油(2和2ncubationmediaMiddleBrook7H基础250g/瓶用于分枝杆菌的分离培养,每90ml培养基中添加0.5ml甘油(2和2114
阪崎肠杆菌检验培养基
LecithinTween80NutrientAgar
假单胞分离琼脂 250(g) incubation media 假单胞分离琼脂 250(g)
快速硫化氢试验琼脂 H2S Test Medium 250克 弯曲杆菌的硫化氢试验
亚利桑那菌琼脂(SA)于亚利桑那沙门氏菌的选择性分离(SN标准)incubationmedia亚利桑那菌琼脂(SA)于亚利桑那沙门氏菌的选择性分离(SN标准)
吲哚培养基(蛋白胨水) 10g 生化培养基,用于细菌靛基质试验,亦称*肉汤(SN标准)
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次图片尿素琼脂培养基基础23090250g用于鉴别肠道菌尿素酶试验
4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮细胞培养基 500 ml incubation media 4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮细胞培养基 500 ml
TryptoseSoyaAgar
草酸钾兔血浆0.2ml*20用于溶血性链球菌的检验
BF839菌计数选择培养基 250g 用于脆弱拟杆菌BF839固体平板计数