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古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次保存使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次保存产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次保存DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间*结 合,长时间退火没有必要。
Prostaglandin F2α (50 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α
Cefoxitin (sodium salt) (250 mg) Betacef|Cenomycin|Farmoxin|Mefoxin|Merxin; (6R,7S)-3-[[(aminocarbonyl)oxy]methyl]-7-methoxy-8-oxo-7-[(2-thienylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid, monosodium salt
L-*(25GM) L-Cystine, 56-89-3; MW 236.15; ≥99%
Clenbuterol (hydrochloride) (50 mg) 4-amino-3,5-dichloro-α-[[(1,1-dimethylethyl)amino]methyl]-benzenemethanol, monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol (hydrochloride)
7(Z)-Tricosene (5 mg) 7Z-tricosene; 7(Z)-Tricosene
Spleen Tyrosine Kinase Inhibitor Syk Inhibitor
TBS-Corey Lactone Aldehyde (5 g) [3aR-(3aa,4a,5b,6aa)]-5-(tert-butyl-dimethylsilyl)hexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde; TBS-Corey Lactone Aldehyde
*标记二甲基化组蛋白H3K27多肽 Biotinylated Dimethyl Histone H3K27 Peptide (200 ul)
FTY720 phenoxy-biotin (5 mg) 2-amino-2-[2-(4-octylphenyl)ethyl]-1,3-propanediol-N-biotinoyl-1,5-diampentane; FTY720 phenoxy-biotin
3,4-EDMA (hydrochloride) (50 mg) 3,4-Ethylenedioxy-N-methylamphetamine; 1-(2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride
LE 135 (1 mg) 4-(7,8,9,10-tetrahydro-5,7,7,10,10-pentamethyl-5H-benzo[e]naphtho[2,3-b][1,4]diazepin-13-yl)-benzoic acid; LE 135
PtdIns--4)-P1 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt) (5 mg) DHPI-4-P1|Phosphatidylinositol-4-phosphate C-6, PtdIns--4)-P1 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, disodium salt
Prostaglandin E2 Express EIA Monoclonal Antibody (100 dtn) PGE2 EIA Express Antiserum; Prostaglandin E2 Express EIA Monoclonal Antibody
5-Azidopentanoic Acid (500 mg) 5-Azidovaleric acid|Click Tag
Texas Red叠氮化物 Texas Red azide
(R)-Butaprost (10 mg) 9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; (R)-Butaprost
Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide (25 mg) N-(2-chloroetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2’-chloro-AEA; Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide
N-(1-((cyanometxyl)carbamoyl)cyclohexyl)-4-(4-propylpiperazin-1-yl)benzamide; AAE581 Balicatib
匹克氏肉汤基础B250g用于溶血性链球菌选择性增菌培养。
亚盐-多粘菌素-*琼脂基础 Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base 用于产气荚膜梭菌的平板计数(GB标准)
LST肉汤 LST Broth 250克 各种食品中大肠菌群近似值(MPN)测定
营养琼脂(NA)细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(GB标准)incubationmedia营养琼脂(NA)细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(GB标准)
*盐琼脂 250g 用于*
Brain-HeartBaptistextractionliquidmedium
双料乳糖胆盐(含中和剂)培养基 Double Lactose Bile Medium 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准)
SE增菌液 Selenite Enrichment Medium 250克 增殖标本中的沙门氏菌
亚碲酸盐卵黄增菌液5ml*Baird-Parker琼脂基础中incubationmedia亚碲酸盐卵黄增菌液5ml*Baird-Parker琼脂基础中
WSSalmonellaAgar
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次保存哥伦比亚琼脂培养基2406g灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血,用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)
4651 CM 软骨细胞培养基 500 ml incubation media 4651 CM 软骨细胞培养基 500 ml
紫晶口磨 提高酒的含酯量,生香味 支/瓶
BETA-SSA琼脂250g用于链球菌的选择性分离培养
Cary-Blair氏*(不含琼脂) 250g 用于运送肠道致病菌。
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3100 次保存变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不*, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, 高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合