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真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次运输产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次运输变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不*, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, 高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合.
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次运输DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间*结 合,长时间退火没有必要。
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次运输使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
Prostaglandin F2α (5 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α
Cefoxitin (sodium salt) (1 g) Betacef|Cenomycin|Farmoxin|Mefoxin|Merxin; (6R,7S)-3-[[(aminocarbonyl)oxy]methyl]-7-methoxy-8-oxo-7-[(2-thienylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid, monosodium salt
四水肖钙(500GM) Calcium nitnate, 4H2O, 13477-34-4; ≥99%; HAZARDOUS MATERIAL
Clenbuterol (hydrochloride) (25 mg) 4-amino-3,5-dichloro-α-[[(1,1-dimethylethyl)amino]methyl]-benzenemethanol, monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol (hydrochloride)
7(Z)-Tricosene (10 mg) 7Z-tricosene; 7(Z)-Tricosene
Cathepsin G抑制剂 Cathepsin G Inhibitor
TBS-Corey Lactone Aldehyde (1 g) [3aR-(3aa,4a,5b,6aa)]-5-(tert-butyl-dimethylsilyl)hexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde; TBS-Corey Lactone Aldehyde
*标记二甲基化组蛋白H3K27多肽 Biotinylated Dimethyl Histone H3K27 Peptide (100 ul)
FTY720 phenoxy-biotin (100 ug) 2-amino-2-[2-(4-octylphenyl)ethyl]-1,3-propanediol-N-biotinoyl-1,5-diampentane; FTY720 phenoxy-biotin
3,4-EDMA (hydrochloride) (5 mg) 3,4-Ethylenedioxy-N-methylamphetamine; 1-(2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride
Z-DEVD-FMK (500 ug) N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[(1S)-3-fluoro-1-(2-methoxy-2-oxoethyl)-2-oxopropyl]-L-valinamide, 1,2-dimethyl ester; Z-DEVD-FMK
PtdIns--4)-P1 -1,2-dioctanoyl) -ammonium salt) (5 mg) DOPI-4-P1|Phosphatidylinositol-4-phosphate C-8, PtdIns--4)-P1 -1,2-dioctanoyl) -ammonium salt), 1-(1,2-dioctanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, diammonium salt
Prostaglandin E2 Express AChE Tracer (500 dtn) PGE2 EIA Express Tracer; Prostaglandin E2 Express AChE Tracer
5-Azidopentanoic Acid (250 mg) 5-Azidovaleric acid|Click Tag
SunRed SE SunRed SE
(R)-Butaprost (1 mg) 9-oxo-11。alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; (R)-Butaprost
Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide (10 mg) N-(2-chloroetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2’-chloro-AEA; Arachidonoyl 2’-Chloroetxylamide
6-N-[2-[[4-(2,4-dichloropxenyl)-5-imidazol-1-ylpyrimidin-2-yl]amino]etxyl]-3-nitnopyridine-2,6-diamine; CT 98014 CHIR-98014
Fraser培养基250g用于李氏菌的增菌培养
亚铁琼脂 Ferric Sulfite Agar 用于厌氧亚盐还原梭菌的计数
改良沙氏琼脂培养基 Sabouraud′s Agar,Modified 250克 真菌检测
22iddlebrookOADC增菌液20ml×20支/箱每支用于中incubationmedia22iddlebrookOADC增菌液20ml×20支/箱每支用于中
阪崎杆菌显色培养基 1000ml 用于阪崎杆菌的显色培养,阪崎杆菌显蓝色,其它肠杆菌显无色
乳糖蛋白胨培养液250g用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)
抗生素检定培养基2号(低pH) Antibiotic Agar NO.2 用于四环素,*等效价测定
Honda氏产毒肉汤基础 Honda Toxin-Producing Base 250克 致泻大肠艾希氏产毒培养
亚碲酸钠肉汤培养基基础250用于*的增菌培养。每培养基需另加入钠ncubationmedia亚碲酸钠肉汤培养基基础250用于*的增菌培养。每培养基需另加入钠1ml
动力-吲哚-尿素培养基基础
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次运输动力—盐培养基(A法)22270250g供鉴别测定细菌液化明胶用
4701-prf SM-prf 滑膜细胞培养基 500 ml incubation media 4701-prf SM-prf 滑膜细胞培养基 500 ml
TryptoseSoyaAgar
MC培养基(不含琼脂)250g用于嗜热链球菌增菌培养
硫细菌培养基 250g 用于硫细菌的分离培养