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检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
产品名称 | 猪透明质酸(HA)elisa试剂盒 |
英文名称 | Porcine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit |
货号 | GOY-P73297 |
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
猪透明质酸(HA)elisa试剂盒样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
苹果酸脱氢酶1(MDH1)(酶联免疫吸附试验法) KitforMalateDehydrogenase1(MDH1)
粘蛋白4(MUC4)(酶联免疫吸附试验法) KitforMucin4(MUC4)
神经营养因子4(NT4)(酶联免疫吸附试验法) KitforNeurotrophin4(NT4)
核心蛋白聚糖(DCN)(酶联免疫吸附试验法) KitforDecorin(DCN)
抗肌蛋白(UTRN)(酶联免疫吸附试验法) KitforUtrophin(UTRN)
纤维鞘相互作用蛋白1(FSIP1)(酶联免疫吸附试验法) KitforFibrousSheathInteractingProtein1(FSIP1)
凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)(酶联免疫吸附试验法) KitforThrombin/AntithrombinComplex(TAT)
L选择素(SELL)(酶联免疫吸附试验法) KitforSelectin,Leukocyte(SELL)
多巴胺受体D2(DRD2)(酶联免疫吸附试验法) KitforDopamineReceptorD2(DRD2)
聚集蛋白聚糖(AGC)(酶联免疫吸附试验法) KitforAggrecan(AGC)
醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)(酶联免疫吸附试验法)
醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)(酶联免疫吸附试验法)
醛脱氢酶1家族成员A2(ALDH1A2)(酶联免疫吸附试验法)
醛脱氢酶3家族成员A1(ALDH3A1)(酶联免疫吸附试验法)
醛脱氢酶9家族成员A1(ALDH9A1)(酶联免疫吸附试验法)
醛糖还原酶相似蛋白1(ARL1)(酶联免疫吸附试验法)
Protein kinase G蛋白激酶G种属: Macrophoma│abutilonis Nakata et Takim.苘麻大茎点菌
Low Density Lipoprotein低密度脂蛋白种属: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(武汉1号)
low-density-lipoprotein cholesterol低密度脂蛋白胆固醇种属: Pyricularia│oryzae稻梨孢菌
hypoxia-inducible factor 1α低氧诱导因子-1α种属: Streptomyces│lavendulae var.chromogenes淡紫灰链霉菌产褐色变种
paraoxonase 1对氧磷酶1种属: HycadegrabacterbohaiensisQ15THycadegrabacterbohaiensisQ15T
dopamine多巴胺种属: Alishewanella│fetalis胎儿异希瓦氏菌
diamine oxidase二胺氧化酶种属: Suillus│luteus (L.) Roussel褐环粘盖牛肝
mast cell tryptase肥大细胞类胰蛋白酶种属: Streptococcus│hemolytis-MGMG溶血性链球菌
Pulmonary surfatcant-associated proteinA肺表面活性物质相关蛋白A种属: Cercospora│canescens Ellis & G. Martin变灰尾孢
Pulmonary surfatcant-associated protein B肺表面活性物质相关蛋白B种属: Melanotus│flavolivens黄绿墨耳
Pulmonary surfatcant-associated protein C肺表面活性物质相关蛋白C种属: Suillus│subaureus (Peck) Snell金乳牛肝菌
Pulmonary surfatcant-associated protein D肺表面活性物质相关蛋白D种属: Fusarium│subglutinans (Wollenw. & Reinking) P. E. Nelson T胶孢镰刀菌
secretory immunoglobulin A分泌型免疫球蛋白A种属: Lactobacillus│sharpeae沙氏乳杆菌
Calpain钙蛋白酶种属: Zygosaccharomyces│pseudorouxii假鲁氏接合酵母
Regulator of Calcineurin 1钙调磷酸酶调节蛋白1种属: Cladosporium│martianoffianum Thüm.马丁枝孢