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实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 猪转录因子AP-1 elisa试剂盒 |
英文名称 | Pig Transcription Factor/Activator Protein 1,AP-1 ELISA KIT |
货号 | GOY-P73212 |
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
cyclic adenosine monophosphate, cAMP 试剂盒甘露醇Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
von Willebrand Factor, VWF 试剂盒甘露醇Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
von Willebrand Factor, VWF 试剂盒依克立达Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
Vascular Endothelial cell Growth Factor, VEGF 试剂盒盐酸文拉法辛Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
Vascular Endothelial cell Growth Factor, VEGF 试剂盒盐酸文拉法辛Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
Osteopontin, OPN 试剂盒 原卟啉IXRabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
Osteopontin, OPN 试剂盒 甲磺酸罗哌卡因Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
lipoprotein-associated phospholipase A2, Lp-PL-A2 试剂盒甲磺酸罗哌卡因Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
lipoprotein-associated phospholipase A2, Lp-PL-A2 试剂盒扎氯铵Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
50% complement hemolysis, CH50 试剂盒扎氯铵Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
50% complement hemolysis, CH50 试剂盒甲硫酸新斯的明Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
acetylcholine receptor antibody, AChRab 试剂盒 甘草酸二钾Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
acetylcholine receptor antibody, AChRab 试剂盒 尼美舒利Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
inducible nitric oxide synthase, iNOS 试剂盒 盐酸奥昔布宁Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
inducible nitric oxide synthase, iNOS 试剂盒 奥扎格雷Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
Heat Shock Protein 90, HSP-90 试剂盒苄氨酸Rabbit/兔试剂盒规格:48T/96T
猪转录因子AP-1 elisa试剂盒adrenomedullin肾上腺髓质素种属: Cercospora│sorghi Ellis & Everh.高粱尾孢
Renin肾素种属: Lentinula│edodes (Berk.) Pegler香菇7
Plasma renin activity肾素活性种属: Fusidium│sp.梭孢霉属
Kidney injury molecule 1肾损伤分子1种属: Penicillium│spinulosum小棘青霉
growth differentiation factot15生长分化因子15种属: Alternaria tenuissima (Kunze) Wiltshire细极链格孢(斜面)
growth hormone生长激素种属: Streptomyces│aurini金黄橙链霉菌
growth hormone releasing peptide-Ghrelin生长激素释放肽ghrelin种属: Streptomyces│coelicolor (Müller) Waksman and Henrici天(蓝)色链霉菌
growth hormonere-leasing factor生长激素释放因子种属: Psathyrella│candolleana (Fr.) Maire薄花边伞1-4
growth-regulated oncogeneβ;melanoma growth stimulating activity生长调节致癌基因β;黑素瘤生激因子种属: Tulasnella│calospora (Boud.) Juel美孢胶膜菌
Gas6生长停滞基因6种属: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇?法无孢
growth-associated protein 43生长相关蛋白43种属: Escherichia│coli大肠埃希氏菌DH5a/phA3G(1-103)-mA3(112-381)
Somatostatin生长抑素种属: Issatchenkia│siamensis暹罗伊萨酵母
Growth Factor Receptor Bound Protein 2生长因子受体结合蛋白2种属: Agaricus│bisporus (J.E. Lange) Imbach#双孢蘑菇AS2796
ECRG4食道癌相关基因4蛋白种属: Erythrobacter│sp.红色杆菌
Retinol-binding protein视黄醇结合蛋白提供形式: 滤纸片pETPT7
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。