G6PDH6磷酸葡萄糖脱氢酶紫外分光光度法
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产品简介

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详细介绍

商品介绍:

测定意义

G6PDH(EC 1.1.1.49)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是磷酸戊糖途径的关键酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化为 6 -磷酸葡萄糖酸内酯,同时将NADP+还原为NADPH,供生物合成及维持细胞内的还原状态用。因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。

测定原理:

G6PDH催化NADP+还原生成NADPH,在340 nm下测定NADPH增加速率。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。

公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。

产品名称:G6PDH6磷酸葡萄糖脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法

规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

货号:FS-01S63243
QQ截图20220307153604.png

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

粗酶液提取:

1、细胞或组织样品的制备:

培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

猪多巴脱羧(DDC)联免疫试剂盒  麦克默多生孢八叠球PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)

猪麦考(MPA)联免疫试剂盒球形芽孢杆Phospho-Stat5 (Tyr694) (C71E5) Rabbit mAb (PE Conjugate)

I型前胶原(PCI)联免疫试剂盒短芽孢杆RXRα Antibody

猪碳酐III(CA3)联免疫试剂盒水单胞NME1/NDKA (D18F10) Rabbit mAb

p53上调凋亡调节因子(PUMA)联免疫试剂盒红曲霉DRP1 (D8H5) Rabbit mAb

猪蛋白二硫化物异构A6(PDIA6)联免疫试剂盒TardiphagaHDAC4 (4A3) Mouse mAb

猪胃动(MTL)联免疫试剂盒 Phytophthora syringoeHDAC4 (4A3) Mouse mAb

猪转铁蛋白受体2(TFR2)联免疫试剂盒草菇SMC2 (D91E3) Rabbit mAb

L选择(SELL)联免疫试剂盒梭孢环柄菇IL-1α (D4F3S) Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjugate)

I型胶原交联羧基端肽(CTXI)联免疫试剂盒 Bacillus humi Phospho-Cyclin D3 (Thr283) (E1V6W) Rabbit mAb

τ-蛋白激1(τPK1)联免疫试剂盒松树土类芽孢杆Stat6 (D3H4) Rabbit mAb

猪胰脂肪(PL)联免疫试剂盒 大肠埃希氏KHSRP Antibody

猪粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)联免疫试剂盒 博斯氏属Phospho-eIF4B (Ser406) Antibody

猪多功能蛋白聚糖(VS)联免疫试剂盒芽孢杆属Ribosomal Protein L26 (D8F6) Rabbit mAb

猪半乳凝集2(GAL2)联免疫试剂盒刚毛丝毛伏革EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
G6PDH6磷酸葡萄糖脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法盐基脲 分析标准品,99.95%2- 98%Anti-Phospho-HER2(Tyr1248)  磷化HER2受体抗体

1-基-2-萘-4-磺 97%5-硝基吲哚 98%Anti-Phospho-HER2 (Tyr877)  磷化HER2受体抗体

茜络合指示剂 IndicatorDL-α-基 98%Anti-HER3/ErbB3  HER3受体抗体

97%R-(-)-1,2- 99%Anti-Phospho-HER3 (Tyr1197)  磷化HER3受体抗体

蓝,溶 Biological stain(S)-(+)-1,2- 98%Anti-Phospho-HER3 (Tyr1222)  磷化HER3受体抗体

茜绿 AR2-基异丁 98%Anti-Phospho-HER3 (Tyr1289)  磷化HER3受体抗体

蓝(溶) BS IND4-吡乙盐盐 98%Anti-Hepatitis E Virus ORF3  戊型肝炎病抗体

偶氮胭脂红G Biological stain4-(1-吡咯烷)甲 97%Anti-HGF  肝生长因子抗体


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