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产品名称：ACLATP柠檬酸裂解酶检测试剂盒微量法
规格：100管/96样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63545
商品介绍：
测定意义 ACL（EC4.1.3.8）是脂肪酸合成中的关键酶，其催化产生的乙酰辅酶可用于脂肪酸合成和碳链延长、黄酮类物质合成、氨基酸合成等。 测定原理： ACL在ATP和辅酶存在的情况下催化柠檬酸裂解为乙酰辅酶、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸盐。苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm测定NADH减少速率，计算ACL活性。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
鸡脂蛋白脂(LPL)试剂盒Anti-ANAPC5 Antibody
鸡胸腺(TP5)试剂盒 Anti-ANGPTL7 Antibody整合连接激-1
鸡可溶性CD14分子(sCD14)试剂盒Anti-ANKRD20A3 Antibody芳香化（抗原）
鸡胰岛(INS)试剂盒Anti-ANGPTL7 Antibody肺表面活性蛋白C抗原
鸡甲状腺(T4)试剂盒Anti-ANKRD26 Antibody肥大类糜蛋白1
鸡促红生成(EPO)试剂盒Anti-ANKRD1 Antibody铜蓝蛋白抗原
鸡甘露糖受体C1(MRC1)试剂盒 Anti-ANKRD20A1 Antibody趋化样蛋白
鸡胰岛样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)试剂盒 Anti-ANKRD30A Antibody
鸡T活化连接蛋白(LAT)试剂盒Anti-ANKRD30A Antibody凋亡关联酪激抗原
鸡激锚定蛋白1(AKAP1)试剂盒 Anti-ANO1 Antibody水通道蛋白-2（抗原）
鸡肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)试剂盒Anti-ANO7 Antibody腺苷三磷结合盒转运体A1抗原
鸡胃动蛋白2(GKN2)试剂盒Anti-ANO9 Antibody组织因子途径抑制剂
鸡酮脱氢E1(PDH E1)试剂盒Anti-AOX1 Antibody葡萄糖转运蛋白12
鸡抗酰tRNA合成抗体(Anti-AlaRS/Anti-PL12)试剂盒 Anti-ANOS1 Antibody表皮生长因子受体III型突变体抗原
鸡脱氢表雄酮硫酯(DHEA-S)试剂盒 Anti-AP2A1 AntibodyCD26抗原
ACLATP柠檬酸裂解酶检测试剂盒微量法胰辅脂抗体Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA KitM H 肉汤（MHB） 用于敏感试验
19号染色体开放阅读框45抗体Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit氧化型Ⅱ
过氧化氢诱导转录蛋白1抗体Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit苦玄参苷IA Picfeltarraenin IA
核因子NFκB激活蛋白1抗体Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit柯诺辛 Corynoxine
第12号染色体开放阅读框23抗体Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人表面活性蛋白A（SP-A）ELISA试剂盒, SP-A ELISA kit
γ-连环/连接蛋白γ抗体Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）ELISA试剂盒,SP-A ELISA kit
10号染色体开放阅读框4抗体Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人丙转/谷丙转（ALT/GPT）ELISA试剂盒, ALT/GPT ELISA kit
10号染色体开放阅读框47抗体Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人层连蛋白/板层（LN）ELISA试剂盒, LN ELISA kit
