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真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次价格使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次价格产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次价格DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间*结 合,长时间退火没有必要。
Prostaglandin F2α (1 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α
Lofexidine (hydrochloride) (250 mg) 2-[1-(2,6-dichlorophenoxy)ethyl]-4,5-dihydro-1H-imidazole, monohydrochloride
活性炭(500GM) Charcoal, Activated & Acid Washed, 7440-44-0
Clenbuterol (hydrochloride) (10 mg) 4-amino-3,5-dichloro-α-[[(1,1-dimethylethyl)amino]methyl]-benzenemethanol, monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol (hydrochloride)
8-methyl Nonanoic Acid (1 g) 8-methyl Nonanoic Acid; Isocapric Acid; 8-methyl Nonanoic Acid
N-(2,2,2-trichloro-1-(3-quinolin-8-lthioureido)ethyl)cinnamamide; SAL; eIF-2α Inhibitor Salubrinal
FFA Assay Cofactor 2 (1 ea) FFA Assay Cofactor 2
二甲基化组蛋白H3K27多肽 Dimethyl Histone H3K27 Peptide (100 ul)
DEPMPO-biotin (50 ug) N-[3-[[5-[(3aS,4S,6aR)-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]propyl]-[(2S,3R)-2-(diethoxyphosphinyl)-3,4-dihydro-2-methyl-1-oxido-2H-pyrrol-3-yl]methyl ester-carbamic acid; DEPMPO-biotin
Benzydamine (5 mg) N,N-dimethyl-3-[[1-(phenylmethyl)-1H-indazol-3-yl]oxy]-1-propanamine
Z-DEVD-FMK (1 mg) N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-α-aspartyl-L-α-glutamyl-N-[(1S)-3-fluoro-1-(2-methoxy-2-oxoethyl)-2-oxopropyl]-L-valinamide, 1,2-dimethyl ester; Z-DEVD-FMK
5α-hydroxy-6-keto Cholesterol (50 mg) Cholestane-6-oxo-3β,5α-diol|6-Oxo-3,5-diol, 5α-hydroxy-6-keto Cholesterol, 3.beta.,5.alpha.-dihydroxy-cholestan-6-one
Human Plasma (500 dtn) Human Plasma
BRD32048 (500 ug) N2-(4-metxoxypxenyl)-6-(1-piperidinylmetxyl)-1,3,5-triezine-2,4-diamine
yenine 5。5叠氮化物 [相当于Cy5。5叠氮化物] yenine 5。5 azide [equivalent to Cy5。5 azide]
Butaprost (free acid) (10 mg) 9-oxo-11。alpha。,16S-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid; 15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1|(±)-15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1; Butaprost (free acid)
Arachidonoyl Cyclopropylamide (5 mg) N-cyclopropyl-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACPA; Arachidonoyl Cyclopropylamide
4,4-Difluoro-8-(4-ethynylpxenyl)-1,3,5,7-tetrametxyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene BODIPY-Acetylene Reagent
ColumbiaMedium
亚利桑那菌琼脂(SA) Salmonella Arizona Agar 用于亚利桑那沙门氏菌的选择性分离(SN标准)
小麦胚芽粉 Wheat gern powder 500克 BR
布氏琼脂250g/瓶用于弯曲菌、布鲁氏菌属分离incubationmedia布氏琼脂250g/瓶用于弯曲菌、布鲁氏菌属分离
EndoAgar
AgarmediumO(Baird-Parkeragar)
BAIRD-PARKER 贝尔德-帕克琼脂/葡萄状球菌选择培养基 incubation media BAIRD-PARKER 贝尔德-帕克琼脂/葡萄状球菌选择培养基
溴化十六烷基*铵琼脂培养基 250g 用于绿脓杆菌及其它革兰氏阴性非发酵菌的选择性分离培养。(《中华人民共和国药典》2010年版)
亚碲酸钾血琼脂基础PotassiumluriteBloodAgarBase用于白喉杆菌的分离培养
双歧杆菌琼脂培养基 250g 用于双歧杆菌的分
真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次价格氧化*胺培养基250g用于分解
50010 琼脂粉 BR 250 g 培养基凝固剂 incubation media 50010 琼脂粉 BR 250 g 培养基凝固剂
酮丛毛单胞菌 反硝化细菌 支/瓶
LBBroth(Miller)
YPDAMedium
真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次价格变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不*, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, 高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合