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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-016119-1 |
商品介绍:
测定意义: PDC主要存在于酵母中,是乙醇发酵的关键酶之一,催化丙酮酸脱羧生成乙醛。 测定原理: PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛,添加乙醇脱氢酶(ADH)来进一步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+没有;通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算PDC活性。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体链霉菌95-D(人高转移肺癌)
TBC结构域TBCD4蛋白抗体烟色离褶伞A2780(人卵巢癌)
肿瘤坏死因子受体相互作用蛋白抗体白被黑蛋巢786-O(人肾透明癌)
肿瘤坏死因子受体相关蛋白4抗体芽孢杆菌小鼠胎儿成纤维*培养基
结构蛋白家族1抗体柯氏黑蛋巢BxPC-3(人原位胰腺腺癌)
癌雌激su诱导蛋白抗体棒曲霉A673(人横纹肌瘤)
跨膜蛋白18抗体大肠埃希菌293A (人胚肾)
磷酸化雌激su反应指状蛋白抗体尖孢镰刀菌小鼠气管上皮*培养基
磷酸化神经特异性微管蛋白抗体酿酒酵母小鼠小梁网*培养基
瞬时受体电位离子通道蛋白7抗体(M亚家族)pBBRMCS-2小鼠直肠平滑肌*培养基
“冷”蛋白TRPM8抗体动物双歧杆菌C6(大鼠胶质瘤)
瞬时受体电位离子通道蛋白3抗体(M亚家族)华美链霉菌CRFK(猫肾)
雌激su反应锌指蛋白抗体芽孢杆菌Calu-1(人肺癌)
TWIST蛋白2抗体抗体立枯丝核菌(测序正确)BEL-7402(人肝癌)
磷酸化雌激su反应指状蛋白抗体绒毛栓菌胰凝乳蛋白mei(含100mL酶解缓冲液)
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒微量法衰变加速因子(DAF)试剂盒 Anti-COL17A1 Antibody减数分裂同源蛋白1
BCL2修饰因子(BMF)试剂盒Anti-COL1A1 AntibodyRAS家族关联结构域蛋白7
Bcl2关联永生基因3(BAG3)试剂盒Anti-COL1A1 Antibody环指蛋白74(重组激活基因1)
叉头框蛋白P3(FOXP3)试剂盒Anti-COL18A1 Antibody重组激活基因2蛋白
嗜环蛋白/亲环suA(CYPA)试剂盒 Anti-COL2A1 Antibody受体表达蛋白5/息肉相关蛋白
天青杀su1(AZU1)试剂盒 Anti-COL1A1 Antibody染色体分离调节蛋白1
抑制蛋白β1(ARRβ1)试剂盒Anti-COL3A1 Antibody复制激活因子C1
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后