改良Lowry法蛋白定量试剂盒500T实验方法
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2017-07-10 12:25:09
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改良Lowry法蛋白定量试剂盒500T实验方法公司供应的细胞生物学试剂品种齐全,质量保证,*,欢迎广大科研用户选购!

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改良Lowry法蛋白定量试剂盒500T实验方法实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
    把试剂盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
1)取 1060 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 孵育20 分钟。
3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液()加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(),并放置于冰浴。
437孵育结束后,600g 4 离心3 4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
5)用JC-1 染色缓冲液()洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液()重悬细胞,600g 4 离心34 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液()重悬细胞,600g 4 离心 34 分钟,沉淀细胞,弃上清。
6)再用适量 JC-1 染色缓冲液()重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
改良Lowry法蛋白定量试剂盒500T实验方法注意事项
1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
2PIpropidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4下操作,以免影响细胞状态。
5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
7PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
FGF10 Protein Human 重组人 FGF10 蛋白

大鼠肠巨噬细胞*培养基 100mL

NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicastrin / NCSTN 人细胞裂解液 (阳性对照)

R 1610仓鼠肺细胞 R 1610 hamster lung cells DMEM+10%FBS

直结肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)

Chang liver (CCL13) (人张氏肝细胞) 5×106cells/瓶×2 人心脏微血管内皮细胞HCMEC
CM-R085大鼠表皮角化细胞*培养基100mL

COL9A1 Others Human COL9A1 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠星形胶质细胞MA

BLO-11细胞,小鼠骨骼成纤维细胞 人肾癌Wilms细胞,G401细胞 人膀胱平滑肌细胞HBdSMC

小耳猪肺细胞;SEP-L2

NRP1 Others Human NRP1 / Neuropilin-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
IL17RC Others Human IL17RC (aa 1-454) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人张氏肝细胞;Chang liver

恒河猴肾细胞;RM-3

HuT78细胞,T淋巴细胞白血病细胞 恶性黑色素瘤,A375细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-01

615小鼠状肺腺癌瘤株;P615

SERPING1 Others Human SERPING1 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人神经生长因子前体(proNGF)免疫试剂盒 Human Pro-Nerve growth factor,proNGF ELISA kit

Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

BAD蛋白表达西方杂交分析试剂盒5

HumanmembraneIgD,mIgDELISA试剂盒人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA试剂盒规格:96T/48T

HumanplasminogenactivatorPLGAELISAKit人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人游离*状腺原酸(FT3)Elisa试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human cyclin dependent kinase 5 (CDK5) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒

Humanmetanephrine,MNELISAKit 人变肾上腺素(MN)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanintercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISA试剂盒人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒规格:96T/48T

组织碱性焦磷酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法定量检测试剂盒20

Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor,KIRELISAKit人杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
改良Lowry法蛋白定量试剂盒500T实验方法大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠白三烯B5(LTB5)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

 

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