细胞冻存用DMSO(无菌)50ml实验方法
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2017-07-10 09:09:53
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产品简介

公司供应的细胞冻存用DMSO(无菌)50ml实验方法品种类齐全,检测效果好,质量保证,欢迎广大科研用户!

详细介绍

细胞冻存用DMSO(无菌)50ml实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
细胞冻存用DMSO(无菌)50ml实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应515min
3.加入500μL1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
2)用PBS洗涤细胞两次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
5)避光、室温反应5 min
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
细胞冻存用DMSO(无菌)50ml实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTACa2+螯合,影响Annexin V的结合。
1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer
2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心510分钟,收集细胞;
3)细胞洗涤:用预冷1×PBS4)重悬细胞一次,2000rpm离心510分钟,洗涤细胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 悬浮细胞;
5Annexin V-FITC标记:加入5μLAnnexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
6PI标记:上机前5分钟再加入5μLPI染色。
7)上机前,补加200μL1×Binding Buffer
SK-MEL-1(人皮肤黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

Balb/c小鼠骨髓间质干细胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells

KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人细胞裂解液 (阳性对照)

H4细胞,人脑神经胶质瘤细胞(H4) 肠炎沙门氏菌 人心脏成纤维细胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg

人髓母细胞瘤细胞;D341Med

HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 猕猴皮肤细胞;MMS7
GBC-SD, 人胆囊癌细胞

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大鼠脑动脉血管内皮细胞*培养基 100mL

Hs 746T人胃癌细胞 Hs human gastric cancer cells 746T DMEM+10% FBS

IFNA10 Protein Human 重组人 Interferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 标签)

MDA-MB-415(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 NRK(大鼠肾细胞)
小鼠肾脏上皮细胞(MREpiC)(5×105)

人脐静脉内皮细胞cDNAHUVEC cDNA

大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J

杂交瘤(B);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠视网膜神经节细胞*培养基 100mL

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TNFRSF11B Others Human TNFRSF11B / OCIF 人细胞裂解液 (阳性对照)
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英文名称RatangiotensinogenELISAKit大鼠血管紧张素原(aGT)规格:96T/48T

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