DEAE-Dextran细胞转染试剂盒200T使用说明书
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2017-07-10 09:11:30
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产品简介

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详细介绍

DEAE-Dextran细胞转染试剂盒200T使用说明书使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
DEAE-Dextran细胞转染试剂盒200T使用说明书操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应515min
3.加入500μL1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
2)用PBS洗涤细胞两次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
5)避光、室温反应5 min
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
DEAE-Dextran细胞转染试剂盒200T使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTACa2+螯合,影响Annexin V的结合。
1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer
2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心510分钟,收集细胞;
3)细胞洗涤:用预冷1×PBS4)重悬细胞一次,2000rpm离心510分钟,洗涤细胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 悬浮细胞;
5Annexin V-FITC标记:加入5μLAnnexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
6PI标记:上机前5分钟再加入5μLPI染色。
7)上机前,补加200μL1×Binding Buffer
SUP-B15(Ph+急淋白血病细胞系) 5×106cells/瓶×2

兔脂肪间质干细胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells

APCS Others Human Serum amyloid P component / APCS / SAP 人细胞裂解液 (阳性对照)

BE(2)-M17细胞,人神经母细胞瘤细胞 寄生曲霉 293来源病毒包装细胞;ΦA

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3

Hepa 1-6(小鼠肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]
人气管平滑肌细胞cDNAHTSMC cDNA

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照)

人表皮黑色素细胞*培养基 100mL

VSMC细胞,大鼠胸主动脉平滑肌细胞 786-0(肾透明细胞腺癌) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化);PC-12(高分化)

EFNB2 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 标签)

A2(人腺样囊性癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤细胞;B16
CAMK1G Others Human CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人气管平滑肌细胞RNAHTSMC miRNA5 μg

小耳猪肾细胞;SEPfk

Caco-2细胞,结肠腺癌细胞 鼠胸腺激酶缺陷细胞株,L-M TK细胞 人细胞;Hela P10s-11F

615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS

IL13RA1 Others Mouse 小鼠 IL13Ra1 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 ,英文名: Aβ1-40 ELISA Kit

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