变性蛋白裂解液50ml实验方法
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变性蛋白裂解液50ml实验方法

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2017-07-10 12:18:12
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产品简介

公司供应的变性蛋白裂解液50ml实验方法品种类齐全,检测效果好,质量保证,欢迎广大科研用户!

详细介绍

变性蛋白裂解液50ml实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
变性蛋白裂解液50ml实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应515min
3.加入500μL1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
2)用PBS洗涤细胞两次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
5)避光、室温反应5 min
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
变性蛋白裂解液50ml实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTACa2+螯合,影响Annexin V的结合。
1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer
2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心510分钟,收集细胞;
3)细胞洗涤:用预冷1×PBS4)重悬细胞一次,2000rpm离心510分钟,洗涤细胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 悬浮细胞;
5Annexin V-FITC标记:加入5μLAnnexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
6PI标记:上机前5分钟再加入5μLPI染色。
7)上机前,补加200μL1×Binding Buffer
EGFL7 Protein Human 重组人 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 标签)

大鼠食管平滑肌细胞*培养基 100mL

REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人细胞裂解液 (阳性对照)

A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞 A7r5 rat thoracic aortic smooth muscle cells 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

人肺间充质干细胞HPMSC

WTRL1(大鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2 原代肝实质细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100ml
大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3

CRP Others Human CRP / C-Reactive Protein 人细胞裂解液 (阳性对照)

AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞

HuH-6人肝母细胞瘤细胞 HuH-6 human hepatoblastoma cell DMEM+10% FBS

BMP2 Protein Danio rerio (zebrafish) 重组斑马鱼 BMP-2 / BMP2A 蛋白

人肾脏上皮细胞(HREpiC)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse
TERF1 Others Human TERF1 / TRF1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人羊膜上皮细胞cDNAHAmEpiC cDNA

正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F

AGS细胞,胃腺癌细胞 人喉癌细胞,TU 686细胞 大鼠垂体瘤细胞;MMQ

杂交瘤(B);Z1510C6D10F4G6

TREM2 Others Human TREM2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

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MousegranzymesB,Gzms-BELISAKit小鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒规格:96T/48T

人抗丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)ELISA试剂盒规格:96T/48T

humanMAXdimerizationprotein1,mxd1ELISA试剂盒人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒规格:96T/48T

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人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

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