大鼠胎儿表皮角质形成层细胞操作
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大鼠胎儿表皮角质形成层细胞操作

T25m2大鼠胎儿表皮角质形成层细胞操作

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-06-20 16:01:45
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上海莼试生物技术有限公司

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产品简介

大鼠胎儿表皮角质形成层细胞操作收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

详细介绍

注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,375%CO2培养。

产品名称

大鼠胎儿表皮角质形成层细胞操作

规格

T25m2

货号

CS-963928

大鼠胎儿表皮角质形成层细胞【Rat Embryo: Normal Fetal Epidermal Keratinocytes产品描述:提供的原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1 HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
收到冻存细胞的处理方法:
1.37°C水浴预热培养基;
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧)
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2
.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3
.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4
.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5
.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠组胺(HIS)ELISA检测试剂盒RatHistamine,HIS 96T/48T 氯化铯  Cesium chloride  质量规格:>99%,分子生物学级

大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA检测试剂盒Rathiston-H2b 96T/48T 氢二钠七水   phosphate, dibasic, heptahydrate  质量规格:>98%,BR

大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA检测试剂盒RatCathepsinK,cath-K 96T/48T dATP溶液(100 mM)  dATP 100 mM solution  质量规格:>97%,BR

大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA检测试剂盒RatHistoneDeacetylase,HD 96T/48T 癸酸钠   decanoate  质量规格:>99%,进分

大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA检测试剂盒RatTissuePolypeptideAigen,TPA 96T/48T 琼脂糖(美仑电泳级)  Agarose  质量规格:美仑,电泳级

大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA检测试剂盒RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PA 96T/48T 琼脂糖(Sigma)  Agarose  质量规格:Sigma原装

大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA检测试剂盒RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPI 96T/48T 植物血凝素  Phytohemagglutinin  质量规格:BR

大蒜*培养基500毫升溶液/片剂 6-糠基氨基嘌呤,激动素  Kinetin,6-Furfurylaminopurine  质量规格:>98%,BR

大岩筒(gloxinia)增殖培养基500毫升溶液/片剂 乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸  EGTA, egtazic acid  质量规格:>98%,分子生物学级

单胺氧化酶系列高通量筛选荧光检测试剂盒500 无水二氢钠(分子生物学级)   phosphate, monobasic, anhydrous  质量规格:>98.5%,分子生物学级
Humandynamin2,DNM2ELISAKit 人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 DL-苹果酸  DL-Malic acid  质量规格:>98%,BR

Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISA试剂盒人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA试剂盒规格:96T/48T 硫酸亚铁七水(AR)  Iron(II) sulfate, heptahydrate  质量规格:AR,>99%

真菌/酵母细胞线粒体分离(活性)试剂盒10 三钾  Potassium phosphate, tribasic  质量规格:>98%

MouseAquaporin4,AQP-4ELISAKit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 钙黄绿素二钠盐  Calcein,  salt  质量规格:IND grade

小鼠牛小肠碱性0酸酶(CIAP)ELISA试剂盒 ,英文名: CIAP ELISA Kit 植酸钠  Phytic acid dodeca salt hydrate  质量规格:>98%,BR

小鼠Ⅲ型前胶原肽(PNP)ELISA检测试剂盒MouseN-terminalprocollagenpropeptide,PNPELISAKit 96T/48T 菊粉;菊糖  Inulin from chicory  质量规格:>90%,BR

人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)试剂盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-Ab ELISA Kit 孔雀绿  Malachite green  质量规格:IND grade

RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 聚乙二醇2000  PEG 2000  质量规格:M.W:2000

COLLAGENII蛋白共沉淀分析试剂盒5 硫代氨基脲(AR)  Thiosemicarbazide  质量规格:AR,>98%

MouseMyoglobin,MYO/MBELISA试剂盒小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氯化亚铁四水(AR)  Iron (II) chloride, tetrahydrate  质量规格:AR,>99%
大鼠胎儿表皮角质形成层细胞操作顶体形态刀A凝集素荧光标记(ConA-FITC)染色试剂盒20 灵芝酸 B  Ganoderic acid B  质量规格:HPLC98%,标准品

顶体形态花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂盒20 灵芝醛A(标准品)  Ganoderal A  质量规格:HPLC95%,标准品

顶体形态豌豆凝集素荧光标记(PSA-FITC)染色试剂盒20 灵芝醛A HPLC98% 20mg

动物扁桃腺组织细胞分离培养试剂盒10 灵芝内酯B HPLC98% 20mg

动物垂体组织细胞分离培养试剂盒10 灵芝马酮 HPLC98% 5mg

动物单酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量检测试剂盒20 灵芝醇F HPLC98% 5mg

动物单核白细胞/细胞分离试剂盒10 灵芝醇A HPLC98% 5mg

动物多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量检测试剂盒20 灵芝醇 B HPLC98% 5mg

动物多核白细胞分离试剂盒10 膦酰二肽钠  Phosphoramidon di salt  质量规格:0.99

动物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量检测试剂盒20 磷脂酶A2激活肽  Phospholipase A2 ActivatingPeptide  质量规格:>95%,BR

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