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我公司提供原代细胞、细胞系、细胞株和菌种,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和*培养条件。纯度可达 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 规格 | 货号 |
293FT:胚肾细胞厂家 | T25m2 | CS-963211 |
描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理方法:
以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理,如需要更详细技术指导,请及时电话或邮件联系。
一.贴壁细胞
客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。
显微镜观察细胞,当细胞融汇至80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
1000rpm,5min离心,重悬细胞。换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2 培养。
二.悬浮细胞
1. 接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张)。
3. 严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒)。
5. 1000rpm,5min离心,重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2 培养细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
Anti- KGF/FGF-7 角质形成细胞生长因子受体/纤维母细胞生长因子-7抗体 0.1ml
Anti-FGF-8/HBGF-8 成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8抗体 0.1ml
anti-FGF-10 成纤维细胞生长因子-10/纤维母细胞生长因子-10抗体 0.2ml
Anti-KGFR 角质形成细胞生长因子受体抗体 0.2ml
Anti-FGFR1 纤维母细胞生长因子受体1抗体 0.1ml
Anti-FGFR2 成纤维细胞生长因子受体2抗体 0.1ml
Anti-FGFR3 成纤维细胞生长因子受体3抗体 0.1ml
Anti-FGFR4 成纤维细胞生长因子受体4抗体 0.1ml
Anti-fgl2 凝血酶原酶抗体/纤维介素蛋白/前凝血素抗体 0.1ml
anti-Fibulin 1 抗“衰老关键蛋白”抗体 0.1ml
Anti-FLIP S/L 凋亡调节基因之一抗体 0.1ml
Anti-FN 纤维连结蛋白抗体 0.1ml
Anti-FOSB FosB抗体 0.2ml
Anti-FOSL1 FOSL1抗体 1ml
Anti-FOSL2 FOSL2抗体 0.1ml
anti-FoxP1 FoxP1抗体 0.1ml
Anti-FoxP3 叉头蛋白3-T细胞转录因子 0.1ml
anti-Measles virus of fusion protein 抗麻疹病毒抗体 0.1ml
Anti-FSH 鼠抗人促卵泡生成素单克隆抗体 0.1ml
anti-FSH-R 促卵泡刺激素受体抗体 0.2ml
Anti-G Protein G蛋白/鸟苷酸结合蛋白抗体 0.1ml
Anti-GABA-ARα1 γ1氨基丁酸受体α1抗体 0.1ml
anti-GABAB1 抗g-氨基丁酸B1受体抗体 0.2ml
anti-GABAB2 抗g-氨基丁酸B2受体抗体 0.1ml
Anti-GAD-65 谷氨酸脱羧酶-65抗体 0.1ml
Anti-GAD-67 谷氨酸脱羧酶-67抗体 0.1ml
Anti-Galanin 神经节肽抗体“甘丙肽” 0.2ml
Anti-Galectin-3 半乳糖凝集素-3抗体 0.1ml
Anti-GAP-43 神经生长相关蛋白-43 0.1ml
Anti-GAPDH 3-磷酸甘油醛脱氢酶 0.1ml
Anti-GASR G蛋白偶联受体-2抗体 0.1ml
Anti-Gastrin 胃泌素/蛙皮素抗体 0.1ml
Anti-Gax 生长终止特异性同源盒基因抗体 0.2ml
Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体 0.1ml
HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1) ELISA Kit 人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1 96T
EAR12(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12) ELISA KIT 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12 96T
EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3 96T
EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员2 96T
DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氢嘧啶酶样3 96T
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶 96T
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶 96T
HK3(Human hexokinase 3) ELISA Kit 人己糖激酶3 96T
PFKP(Human phosphofructokinase-platelet) ELISA Kit 人血小板型磷酸果糖激酶 96T
UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit 人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶 96T
Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相关半胱氨酸肽酶4 96T
PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶 96T
DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit 人二氢嘧啶酶样2 96T
SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT 人血清/糖皮质激素调节激酶2 96T
MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit 人丝裂原活化蛋白激酶激酶6 96T
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇维生素B6磷酸酶 96T
Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit 人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶 96T
FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基转移酶1 96T
D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳酸脱氢酶 96T
Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰蛋白酶 96T
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽释放酶1 96T
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽释放酶6 96T
PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit 人磷酸化乙酰辅酶A 96T
PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸变位酶2 96T
PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 96T
293FT:胚肾细胞厂家PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit 人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1 96T
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T
ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ转化酶 96T
AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人抑肽酶 96T
Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12 96T