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描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
产品名 | 22RV1前列腺癌细胞价格 |
规格 | T25m2 |
货号 | CS-963210 |
收到冻存细胞的处理方法:
1.37°C水浴预热培养基;
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人肠脂肪酸结合蛋白 96T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子
Anti-Dnmt3β DNA甲基转移酶-3β抗体 0.1ml
Anti-DPPA2 多能发育相关基因2抗体 0.2ml
Anti-DR3/TNF-αR/TRAMP TNF-α膜受体抗体/DR3 死亡受体3抗体 0.1ml
Anti-DR4/APO2/TRAILR1 死亡受体4抗体 0.1ml
Anti-DTNBP1 精神分裂症易感基因抗体 1ml
Anti-DVL1 蓬乱蛋白1抗体 0.2ml
Anti-Dynamin 2 兔抗人鸟苷三磷酸酶-发动蛋白2抗体 0.1ml
Anti-E2F1 转录因子E2F-1抗体 0.1ml
Anti-E2F2 转录因子E2F-2抗体 0.1ml
Anti-E7 protein 人乳头瘤病毒16型E7抗体 0.1ml
Anti-EAAT1/Glast 胶质细胞谷氨酸运载蛋白1 抗体 0.1ml
Anti-EBNA-3 EB病毒编码核蛋白-3抗体 0.1ml
Anti-ECE1 内皮素转化酶1ECE1抗体 0.1ml
Anti-ECG2 食道癌相关基因抗体 0.1ml
Anti-ECM1 细胞外基质蛋白1抗体 0.2ml
Anti-ED-1 外胚层发育不良抗体 0.1ml
Anti-EGF-R 表皮生长因子受体抗体 0.1ml
Anti-EGFR-ⅤⅢ 表皮生长因子受体-8抗体 0.2ml
Anti-Egr-1 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗体 0.1ml
Anti-Emp1 表皮膜蛋白1抗体 0.2ml
anti-EMAb 抗子宫内膜抗体 0.2ml
Anti-Endostatin 内皮抑素/内皮他丁抗体 0.1ml
Anti-EpCAM 上皮细胞粘附分子/表皮细胞粘附分子抗体 0.2ml
Anti-EPEC-IgG O 大肠埃希杆菌O抗体 0.2ml
Anti-EphA2 R 酪氨酸蛋白激酶受体A2抗体 0.1ml
Anti-EphB2 R 酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体 0.1ml
Anti-ER 雌激素受体 0.1ml
Anti-ERAB 内质网Aβ相关结合蛋白抗体 0.2ml
1 96T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂联素 96T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人组胺 96T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 96T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特异性碱性磷酸酶B 96T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨钙素/骨谷氨酸蛋白 96T
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受体活化因子配基 96T
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羟基维生素D3 96T
Human histon-H2b ELISA Kit 人组蛋白H2b 96T
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保护素 96T
BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受体Ⅱ 96T
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受体1A 96T
BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki 人骨成型蛋白4 96T
BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 人骨成型蛋白2 96T
cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit 人环磷酸腺苷 96T
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit 人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶 96T
CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶7 96T
CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶2 96T
CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶1 96T
AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人乳酸脱氢酶 96T
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 人解整合素样金属蛋白酶9 96T
BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2 96T
UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1 96T
22RV1前列腺癌细胞价格ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脱氢酶 96T
RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit 人Rho家族GTP酶1 96T
RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit 人受体TNFRSF结合丝氨酸苏氨酸激酶2 96T
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。