大鼠角膜上皮细胞【Rat Eye: Normal Corneal Epithelial Cells】 产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

收到冻存细胞的处理方法：
1.37°C水浴预热培养基；
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续暖细胞）；
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；
4.弃上清，加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中，轻轻晃匀；
5.置于37°C，5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话，瓶盖不要拧太紧)；
6.第二天，用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
英文名称MouseIL-1sRⅠ小鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 9-(2',3',5'-三-氧基-苯-β-D-阿糖)腺嘌呤  9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine  质量规格：美国进口

英文名称MouseIL-1sRⅡ小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)规格：96T/48T 红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤盐酸盐  EHNA   质量规格：美国进口

英文名称MouseIL-1sRⅡ小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)规格：96T/48T 2-氟腺嘌呤  2-Fluoroadenine  质量规格：美国进口

英文名称MouseIL-1β小鼠白介素1β(IL-1β)规格：96T/48T 硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸钠盐  Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt  质量规格：美国进口

英文名称MouseIL-2sRα小鼠白介素2可溶性受体α链(CD25)(IL-2sRα)规格：96T/48T 烟酸腺嘌呤二核苷钠盐  Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate  salt  质量规格：美国进口

英文名称MouseIL-2sRβ小鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)规格：96T/48T 烟酸腺嘌呤二核苷酸钠盐  Nicotinic acid adenine dinucleotide  salt  质量规格：美国进口

英文名称Mouseinducibleniicoxidesyhase小鼠诱导型合成酶(iNOS)规格：96T/48T α-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸  α-Nicotinamide adenine dinucleotide  质量规格：美国进口

英文名称MouseInhibinA小鼠抑制素A(INHA)规格：96T/48T NAD+, 锂盐  NAD+, Lithium Salt  质量规格：美国进口

英文名称MouseinhibinB小鼠抑制素B(INHB0规格：96T/48T 9--d3-腺嘌呤  9-Methyl-d3 Adenine  质量规格：美国进口

英文名称MouseInsulieceptorβ(ISR-β)小鼠胰岛素受体β(ISR-β)规格：96T/48T β-烟酰胺腺嘌呤二核苷, 缩减环已基铵盐  β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt  质量规格：美国进口
小鼠嘌呤核苷酸0酸化酶(PNP)ELISA试剂盒 ，英文名： PNP ELISA Kit 甲酰胺  Formamide  质量规格：>99%,BR

小鼠S100蛋白(S-100)ELISA检测试剂盒MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T 聚乙二醇8000  PEG 8000  质量规格：>99%,分子生物学级

人分泌成分(SC)试剂盒 Human secretory compone,SC ELISA Kit 氯化锂(分子生物学级)  Lithium chloride  质量规格：>98%

RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 硫酸亚铁铵六水  Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate  质量规格：>99%,BR

Chu’sN6*培养基500毫升溶液/片剂 红四氮唑  TTC,TTZ,Tetrazolium Red  质量规格：>98%,BR

Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒规格：96T/48T 磺胺甲氧哒嗪  Sulfamethoxypyridazine  质量规格：>98%,BR

小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA试剂盒 ，英文名： CO ELISA Kit 磺胺甲氧哒嗪(标准品)  Sulfamethoxypyridazine  质量规格：分析标准品

小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA检测试剂盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T TCEP；三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐  TCEP;   质量规格：>99%,BR

人肺炎支原体抗体(MP-Ab)试剂盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit 硫代硫酸钠五水(AR)   thiosulfate, pentahydrate  质量规格：>99%,AR

RatLaminin,LNELISAKit大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒规格：96T/48T 化钠(AR)   iodide  质量规格：>99.5%,AR
大鼠角膜上皮细胞操作蛋白饱和溶液1毫升 硫酸博莱霉素/博来霉素/争光霉素  Bleomycin sulfate  质量规格：含量1.5~2.0U/mg,BR

蛋白变性液10毫升 硫酸铋(>98%,BR)  Bismuth (III) sulfate  质量规格：>98%,BR

蛋白表位标记技术试剂盒5 硫酸钡(>98%,BR)  Barium sulfate  质量规格：>98%,BR

蛋白储存液10毫升 硫酸巴龙霉素(标准品)  Paromomycin Sulfate  质量规格：含量测定

蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液500毫升 硫酸巴龙霉素  Paromomycin Sulfate  质量规格：≥675 U/mg,USP28

蛋白电泳2倍样品处理液10毫升 硫酸铵铝十二水(>98%,BR)  Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate  质量规格：>98%,BR

蛋白电泳SYPRO橙色染色试剂盒10 硫酸铵  Ammonium sulfate  质量规格：>99%,分子生物学级

蛋白电泳固绿染色试剂盒10 硫酸氨基葡萄糖（标准品）  Glucosamine sulfate  质量规格：HPLC≥98%，标准品

蛋白电泳丽春红染色试剂盒10 硫酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg

蛋白电泳尼罗红染色试剂盒20 硫酸安普霉素，硫酸阿布拉霉素  Apramycin sulfate  质量规格：>500U/mg,BR
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。