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大鼠表皮角质形成细胞【Rat Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】 产品描述:提供的原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
产品名称 | 大鼠表皮角质形成细胞价格 |
规格 | T25m2 |
货号 | CS-963926 |
收到冻存细胞的处理方法:
1.37°C水浴预热培养基;
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA试剂盒 ,英文名: CK 18-M65 ELISA Kit 五肽胃泌素 Pentagastrin 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYFRA21-1 ELISA Kit 肽YY,人 Peptide YY, Human 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA检测试剂盒MouseSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIg 96T/48T 肽YY,犬,大鼠,小鼠,猪 Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(CYCS)ELISA试剂盒 ,英文名: CYCS ELISA Kit 磷脂酶A2激活肽 Phospholipase A2 ActivatingPeptide 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒MouseCytochrome-C,Cyt-C 96T/48T 泡蛙肽 Physalaemin 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit PKI-tide PKI-tide 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ(COX3)ELISA试剂盒 ,英文名: COX3 ELISA Kit 血小板因子4 Platelet Factor 4 (58-70)(human) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员27B1(CYP27B1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP27B1 ELISA Kit Pneumadin,人 Pneumadin (human) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员2B6(CYP2B6)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2B6 ELISA Kit Pneumadin,大鼠 Pneumadin (rat) 质量规格:>95%,BR
小鼠细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP2E1 ELISA Kit 朊病毒肽(106-126),人 Prion Peptide (106-126),Human 质量规格:>95%,BR
小鼠旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA试剂盒 ,英文名: PPL ELISA Kit 多聚赖氨酸 Poly-L-lysine 质量规格:BR
人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit 96T/48T 司班80;司盘80 Span* 80 质量规格:BR
大鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒 Rat apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 聚乙二醇1000 PEG 1000 质量规格:分子量1000
英文名称HumanFASLELISAKit人FASL规格:96T/48T 胰蛋白胨(BD) Tryptone 质量规格:BD 211705
动物组织氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒50 丹磺酰氯 DNSCl, Dansyl chloride 质量规格:>98%
ELISAKitIL-17兔白介素17规格:48T/96T N-乙基顺丁烯二 N-Ethylmaleimide 质量规格:>98%,BR
小鼠纽蛋白(VCL)ELISA试剂盒 ,英文名: VCL ELISA Kit 碳酸氢钾(AR) Potassium bicarbonate 质量规格:>99%,AR
人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA检测试剂盒HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit 96T/48T 十二烷基磺酸钠(BR) dodecanesulfonate 质量规格:>98%,BR
大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISA Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit 茶碱 Theophylline 质量规格:>99%,BR
英文名称HumanFASELISAKit人FAS规格:96T/48T 纤维素酶 Cellulase 质量规格:>2000U/mg
大鼠表皮角质形成细胞价格等电聚焦蛋白电泳(IEF)2倍上样缓冲液10毫升 灵芝酸I HPLC≥98% 20mg
等电聚焦蛋白电泳(IEF)标准补水缓冲液50毫升 灵芝酸H甲酯 HPLC≥95% 20mg
等电聚焦蛋白电泳(IEF)强化补水缓冲液50毫升 灵芝酸H HPLC≥95% 20mg
等位基因特异性表达分析试剂盒5 灵芝酸G(标准品) Ganoderic acid G 质量规格:HPLC≥98%,标准品
等位基因特异性表达分析试剂盒5 灵芝酸G HPLC≥98% 20mg
低分子蛋白标准样100 灵芝酸F(标准品) Ganoderic acid F 质量规格:HPLC≥98%,标准品
低内小量质粒抽提试剂盒20/50 灵芝酸F HPLC≥98% 10mg
低盐LB细菌培养液500毫升 灵芝酸DM HPLC≥95% 20mg
地塞米松细胞脂肪诱导生成比色法定量检测试剂盒20 灵芝酸D(标准品) Ganoderic acid D 质量规格:HPLC≥98%,标准品
地生兰(terresial)播种培养基500毫升溶液/片剂 灵芝酸D HPLC≥98% 10mg
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。