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ELISA试剂盒抗原(抗体)对ELISA试验的影响力

时间:2018-01-15      阅读:89

ELISA试剂盒是一种免疫测定,一个抗原分子可带有不同的决议簇。在免疫测定中,抗原是指能与抗体结合的物质。在临床检修中主要经过抗原抗体反响检测体液中的抗体或抗原性物质,ELISA试验抗原的反响性取决于抗原决议簇,或称为表位。免疫测定是应用免疫学技能测定标本的办法。
IgG和IgM的重链别离称为γ链和μ链。抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。Ig的轻链是相同的,有κ和λ两种型别。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE.与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM.Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。五类Ig的重链结构不同,这决议了它们的抗原性也不同。 
ELISA试剂盒可被木瓜蛋白酶分解为三个区段,其间两个相同的区段称抗原结合片断(Fab)。两者构成抗体的抗原结合部位,只与相应的抗原决议簇匹配,发作特异性结合,是抗体专一性结合抗原的结构根底。每个Fab都保存结合抗原的才能,ELISA试验但只要一个抗原结合位点,是单价的,与抗原结合后不泛起凝聚或沉淀。另一区段称Fc段,无抗体活性,但具有IgG*的抗原性。重链和轻链的N端的氨基酸摆放次序因各种抗体而异,称为可变区,别离用VH和VL表明。
ELISA试剂盒如将多种抗原或含有多个抗原决议簇的抗原注入机体,ELISA试验则将由多系的B细胞发生相应的多种抗体,这些抗体均存在于免疫血清中。含有抗体的血清称为抗血清。免疫测定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或马制得。将免疫的脾细胞与小鼠肿瘤细胞融合,别离杂交瘤细胞,接种于小鼠腹腔,发生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。每一系B细胞只发生针对某一抗原决议簇的抗体。单克隆抗体通常用抗原免疫小鼠制备。发生抗体的B细胞可在体外与繁殖力强的肿瘤细胞融合成杂交瘤细胞。将单个杂交瘤细胞别离,在体内或体外培育而分泌的抗体单克隆抗体。单克隆抗体仅针对一种抗原决议簇,具有很高的特异性。

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