ELISA试剂盒在一定的条件（如适当的温度、有机溶剂存在等）下，DNA的双链可解开成为单链，这一过程称为DNA的变性。高温、低盐和有机溶剂促进DNA变性。Tm值是反映DNA的热稳定性的一个参数，ELISA试剂盒称为DNA的熔化温度，ELISA系指一半的双链DNA解离成为单链时的温度。DNA的热稳定性或Tm值直接与其碱基组成特别是GC碱基对含量有关，GC碱基对含量越高，Tm值也越高。DNA的杂交即是变性的单链DNA在一定的条件下（低于Tm的温度下）与其互补序列退火形成双链的过程，因此杂交与Tm值相关。
ELISA试剂盒实验吸取到其它相吹干，准确的取液吹干离心不*，延长离心时间样本的污染，更换样本乳化未处理*，温浴处理乳化现象仪器试剂原因离心管未清洗干净，正确的洗涤器具有机溶剂的影响，做试剂空白看影响结果衍生化试剂原因,更换衍生化试剂与曲线好坏相关,保证曲线的正常DNA的变性和复性。