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如何更好的做ELISA试剂盒实验标曲

时间:2018-01-18      阅读:342

ELISA试剂盒试验标曲做欠好是什么原因,由于刚触摸elisa试验,仍是归于新手,研讨大鼠干扰素相关目标的试验,做完大鼠γ干扰素ELISA试验后反响规范曲线的梯度都欠好。刚加完显色剂的时分梯度还算显着,可是显色比较浅,跟着时刻延伸(大概6、7分钟)今后梯度就不显着了。停止反响后测得的值梯度就没有了。
ELISA试剂盒试验标曲做欠好是什么原因:
1、刚加完显色剂时梯度显着:显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。

2、酶浓度太高,导致zui终显色结果都是高的。
3、包被-酶标体系不匹配或许酶标的非特异反响太强,或许酶标仪读数规模不行,
4、样本中有能够催化底物的物质,没洗下来。
5、主张:包被、酶标重新做梯度,先用较低的浓度把梯度探索好,然后再优化灵敏度,zui终调出所需的灵敏度、线性规模。
6、有条件的话,能够把酶免的蛋白体系移植到板式化学发光上,加完底物三分钟读数。
7、蛋白体系灵敏度够的话,显色十分钟就差不多了。
8、
ELISA试剂盒酶是自己标的这种状况的,HRP份额不要太高。

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